Western blot test, tiež nazývaný imunoblotovanie, je testom na špecifický proteín v proteínovej zmesi. Western blot test sa vykonáva po gélovej elektroforéze alebo teste pomocou enzýmu imunosorbentného testu (ELISA) a na identifikáciu špecifických proteínov sa používajú protilátky.
Bežným testom používaným na separáciu proteínov na použitie pri Western blote je elektroforéza na polyakrylamidovom géle s dodecylsulfátom sodným (SDS-PAGE). Pri prechode gélovou matricou sú proteíny oddelené podľa hmotnosti a elektrických vlastností.
Test ELISA používa na vytvorenie testovacieho povrchu enzýmy alebo protilátky pripojené k pevnému povrchu. Potom sa na skúšobný povrch pridá vzorka. Protilátky alebo enzýmy reagujúce na proteíny alebo sa na ne pripájajú, poukazujú na pozitívny výsledok.
Western blot test sa uskutoční po gélovej elektroforéze. Oddelené proteíny sa prenesú (alebo blotujú) na nitrocelulózové alebo nylonové membrány a identifikujú sa pomocou špecifických protilátok, ktoré sú označené sekundárnym proteínom.
Western blot test sa používa na potvrdenie pozitívnych výsledkov buď gélovej elektroforézy alebo ELISA testov. Western blot test dokáže identifikovať proteíny konkrétnejšie a môže vylúčiť falošné pozitívne nálezy.