Počas tenkovrstvovej chromatografie technik umiestni škvrny chemickej zmesi na plochú dosku potiahnutú vrstvou absorpčného materiálu, potom umiestni spodnú časť doštičky do rozpúšťadla. Keď sa rozpúšťadlo pohybuje hore po doske, chemikálie v zmesi sa pohybujú nahor s rôznymi rýchlosťami, takže sa oddeľujú. Tento test určuje, ktoré chemikálie sú v zmesi, porovnaním rýchlosti neznámej dopravy so známymi štandardmi. Výsledky však môžu ovplyvniť mnohé faktory.
TL; DR (príliš dlhý; Nečítali)
Hodnoty retenčných faktorov v chromatografii na tenkej vrstve sú ovplyvnené absorbentom, rozpúšťadlom, samotnou chromatografickou doštičkou, technikou aplikácie a teplotou rozpúšťadla a doštičky.
Retenčné faktory
Retenčný faktor pre chemikáliu pri tenkovrstvovej chromatografii je mierou toho, ako ďaleko sa pohybuje hore po doske v reakcii na pohyb rozpúšťadla. Pretože absolútny pohyb chemikálie závisí od toho, ako ďaleko rozpúšťadlo prejde, vypočítate hodnoty retenčného faktora vzhľadom na stupeň pohybu rozpúšťadla. Retenčný faktor pre chemikáliu je vertikálna vzdialenosť posunutá chemikáliou od miesta, kde bola pôvodne nanesené na dosku, vydelené vzdialenosťou prejdenou rozpúšťadlom - meranou od rovnakého začiatku bod.
Tenkovrstvová chromatografická doštička
Samotná tenkovrstvová chromatografická platňa môže ovplyvniť hodnotu retenčného faktora získanú pre danú chemikáliu. Tenkovrstvové chromatografické doštičky môžu byť potiahnuté rôznymi absorpčnými látkami; najčastejšie oxid kremičitý alebo oxid hlinitý. Pretože retenčný faktor je založený na relatívnej afinite chemikálie k absorpčnému prostriedku v porovnaní s rozpúšťadlom, zmena absorpčného prostriedku môže výrazne zmeniť retenčný faktor. Hrúbka a rovnomernosť vrstvy absorpčného materiálu sa tiež môže líšiť od platne k platni, najmä ak sú vyrobené ručne. Tieto faktory môžu tiež zmeniť hodnotu retenčného faktora pre chemikálie.
Retenčné faktory ovplyvňujúce rozpúšťadlá
Pretože rozpúšťadlo prenáša chemikáliu na dosku, konkrétne použité rozpúšťadlo bude mať tiež podstatný vplyv na hodnotu retenčného faktora pre chemikáliu. Rozpúšťadlo, ktoré má silnejšiu interakciu s konkrétnou chemikáliou, ľahšie prekoná akékoľvek afinitu chemikálie k absorpčnej vrstve a posunúť ju v danom období ďalej čas. Zmesi rozpúšťadiel môžu mať tiež rôzne účinky v závislosti od podielu každého rozpúšťadla.
Ďalšie faktory
Existuje niekoľko ďalších faktorov, ktoré môžu v niektorých prípadoch ovplyvniť retenčný faktor. Teplota rozpúšťadla a doštičky sa môže mierne meniť, pretože napríklad rozpúšťadlo môže často lepšie rozpúšťať chemikálie, ktoré transportuje, pri vyšších teplotách. Retenčný faktor môže zmeniť aj technika technika pri nanášaní vzorky na platňu. Aplikácia príliš veľkého množstva vzorky môže viesť k tomu, že sa veľké difúzne pásy chemikálie pohybujú hore po platni, čo sťažuje presné meranie vzdialenosti, po ktorej sa chemikália prepravila.