Zostrojte graf koncentrácie produktu v závislosti na čase pre údaje z prvej skúmavky pre enzymatický test. Poznámka: Vodorovná os by mala byť „čas“ a zvislá os by mala byť „koncentrácia produktu“.
Vypočítajte lineárnu regresnú priamku pre údajové body, ktoré ste vykreslili v časti 1, krok 1. Zatiaľ čo program Excel a grafické kalkulačky môžu tento lineárny model ľahko určiť, môžete odvodiť odhad regresie sklon priamky vydelením rozdielu v koncentrácii produktu medzi susednými údajovými bodmi ich rozdielom v čase.
Zaznamenajte sklon lineárnej regresnej priamky z časti 1, krok 2 ako „počiatočná reakčná rýchlosť (Vo)“. Poznámka: V modeli regresnej čiary „[koncentrácia produktu] = m [čas] + b“ je koeficient „m“ sklon.
Opakujte kroky 1, 2 a 3 pre zvyšok skúmaviek v teste.
Vynesie sa inverzná inverzia koncentrácie substrátu pre každú skúmavku proti inverznej hodnote jej počiatočnej reakčnej rýchlosti (z časti 1, krok 4). Napríklad ak je počiatočná rýchlosť pre skúmavku s počiatočnou koncentráciou substrátu 50 mikromólov (uM) bola 80 uM / s, inverzie by boli 1/50 uM pre koncentráciu substrátu a 1/80 uM / s pre počiatočnú rýchlosť. Poznámka: Inverzná koncentrácia substrátu by mala byť na vodorovnej osi a inverzná počiatočná rýchlosť by mala byť na vertikálnej osi.
Poznámka: Koncentrácia substrátu by mala byť na vodorovnej osi a počiatočná rýchlosť reakcie by mala byť na zvislej osi.
Určte lineárnu regresnú priamku pre graf, ktorý ste vykreslili v časti 2, krok 1. Poznámka: pretože budete potrebovať poznať priesečník y regresnej priamky, mali by ste zadávať body z Oddiel 2, Krok 1, buď do Excelu, alebo do grafickej kalkulačky a využite integrované regresné modelovanie funkčnosť.
Vydeľte 1 priesečníkom y od lineárnej regresnej priamky. Získate tak hodnotu inverznej hodnoty Vmax, maximálnej reakčnej rýchlosti pre enzým. Poznámka: ak má model lineárnej regresie tvar „[Inverse Vo] = m [Inverse Substrate Conc.] + B“, potom by hodnota „b“ bola priesečník y. Vydeľte 1 „b“ a vypočítajte inverznú hodnotu k Vmax.
Skutočná hodnota Vmax sa vydelí 1 výsledkom z časti 2, krok 3.
Stanovte koncentráciu enzýmu v pôvodnom teste (pozri nespracované údaje). Poznámka: koncentrácia enzýmu je rovnaká pre všetky skúmavky; v teste sa líšia iba koncentrácie substrátu.
Vydeľte Vmax (z časti 2, krok 4) koncentráciou enzýmu (z časti 2, krok 5). Výsledkom je hodnota Kcat.
Andy Pasquesi, textár v Chicagu, má bohaté skúsenosti s písaním pre automobilový priemysel (BMW, MINI Cooper, Harley-Davidson), finančné služby (Ivy Funds, William Blair, T.) Rowe Price, CME Group), klienti zdravotnej starostlivosti (Abbott) a spotrebného tovaru (Sony, Motorola, Knoll). Je držiteľom titulu Bachelor of Arts v angličtine na Harvardovej univerzite, nezaujíma ho však oxfordská čiarka.