Микробиология - это изучение микроорганизмов: микроскопических или едва заметных одноклеточных форм жизни, таких как бактерии, археи, простейшие и некоторые грибы, и даже очень маленькие многоклеточные растения, животные и грибы. Микробиологи также изучают реалистичные неорганические явления, такие как вирусы, прионы, вироиды и вирионы. «Микроб» - это общий термин для всех этих сущностей. Подсчет в микробиологии - это определение количества отдельных жизнеспособных микробов в образце; Возможны четыре основных метода.
Подсчет культур
Одним из прямых критериев подсчета микробов является стандартный подсчет на чашке, также называемый подсчетом жизнеспособных микроорганизмов. Для этого подсчета вы культивируете образец, разбавляя его, помещая на чашки с питательной средой и инкубируя их в течение установленного времени. Затем вы подсчитываете количество колоний и используете это число для определения исходного количества микробов в образце. С технической точки зрения, подсчет на чашках дает не количество отдельных микробов, а скорее «колониеобразующих» единиц », потому что вы не можете знать наверняка, произошла ли каждая колония от одного микроба или от крошечной группы микробы. Однако эти подсчеты считаются очень точными для оценки количества микробов в исходных образцах. Недостатком является то, что этот тест занимает много времени и места и требует специального оборудования, которое необходимо правильно подготовить.
Индивидуальные подсчеты
Прямой микроскопический подсчет, также называемый общим подсчетом клеток, является еще одной формой прямого подсчета. Сначала вы делите образец на несколько камер одинакового размера. Затем вы определяете среднее количество микробов в камере, подсчитывая некоторые или все под микроскопом. Наконец, вы используете это среднее значение для вычисления числа в исходной единице. Основным недостатком прямого микроскопического подсчета является то, что трудно отличить живые микробы от мертвых, поэтому этот метод может не дать точного жизнеспособного подсчета.
Лучи света, облака микробов
Тесты на мутность являются формой косвенного подсчета. Мутность - это помутнение жидкости. При турбидиметрическом измерении вы помещаете образец в раствор и измеряете непрозрачность нового раствора, просвечивая его светом. с помощью спектрофотометра, затем оцените количество живых микробов, необходимое для достижения наблюдаемого уровня облачности. Недостатком здесь является то, что кто-то, должно быть, уже выполнил многочисленные стандартные подсчеты микробов в чашках. чтобы приготовить образцы растворов различной мутности, чтобы у вас был стандарт для измерения текущего образца против. Вы также должны остерегаться чрезмерной концентрации вашего образца, потому что турбидиметрический подсчет является точным только в том случае, если никакие микробы в образце не блокируют другие. При визуальном сравнении мутности вы сравниваете мутность вашей пробы с мутностью единицы того же размера и известного количества микробов и оцениваете подсчет на основе этого сравнения.
Косвенные результаты
Двумя другими формами косвенного подсчета являются определение массы и измерение микробной активности. Для подсчета определения массы вы взвешиваете количество биологического вещества в вашей пробе, сравниваете это по стандартной кривой для известного количества микробов и оцените исходное количество микробов по этой сравнение. Для измерения микробной активности вы измеряете количество биологического продукта в вашем образце, например: метаболических отходов, затем сравните это со стандартной кривой для известных количеств и оцените свой подсчет на основе этого сравнение.