Enterobacter aerogenes и другие виды Enterobacteriaceae легко идентифицировать с помощью набора для тестирования API-20E. Этот набор, произведенный компанией bioMeriuex Inc., включает 20 мини-пробирок или лунок для теста. Тест состоит из посева чистой бактериальной суспензии в лунки для тестирования и считывания цветных реакций, которые происходят. Идентификация основана на преобразовании результатов этих цветовых реакций в семизначный код, известный как индекс аналитического профиля. Сопоставление этого кода с базой данных производителя позволяет идентифицировать организм.
Откройте ампулу, содержащую 5 мл 0,85-процентной среды хлорида натрия. С помощью пипетки удалите единственную колонию с изолирующей пластины возрастом 18–24 часа и добавьте ее в ампулу. Перемешать до получения однородной суспензии. Используйте эту суспензию, как только закончите ее готовить.
Установите инкубационный ящик, который состоит из ячеек в лотке с крышкой. Откройте коробку и добавьте 5 мл деминерализованной или дистиллированной воды в лунки лотка. Распакуйте полоску, входящую в комплект для тестирования API 20E, и поместите ее в инкубационный ящик.
Заполните пробирку и чашу лунок, отмеченных «GEL», «VP» и «CIT» приготовленной суспензией. В остальные лунки налейте бактериальную суспензию в пробирку, но не в купулу. Добавьте минеральное масло в скважины, обозначенные «ADH», «ODC», «LDC», «URE» и «H2S», чтобы создать анаэробную среду.
Закройте инкубационный ящик крышкой и инкубируйте при температуре от 34 до 38 градусов Цельсия в течение 18–24 часов.
Осмотрите лунки и отметьте реакции в таблице результатов. Если минимум три теста дали положительный результат, переходите к цветным реакциям, используя химические тестовые растворы или реагенты, входящие в комплект. Добавьте одну каплю реагента TDA в хорошо помеченный «TDA» и по капле каждого из реагентов VP1 и VP2 в хорошо обозначенный «ВП». Если менее трех тестов дали положительный результат, инкубируйте полоски еще 24 часа, прежде чем добавлять их. реагенты.
Наблюдайте за изменением цвета в лунках. Красновато-коричневый цвет в TDA указывает на положительную реакцию. Подождите 10 минут после добавления реагентов из набора в VP1 и VP2. Считайте красный или розовый цвет положительным, а бледно-розовый цвет, появившийся через 10 минут, - отрицательным.
Выполните тест на оксидазу, как указано производителем набора, и запишите его результаты вместе с результатами предыдущих 20 тестов.
Введите этот семизначный номер профиля в базу данных производителя комплекта через телефон с тональным набором. Дождитесь получения идентификатора, предоставленного базой данных. Если номер профиля не дает конкретных результатов, выполните дополнительные тесты, указанные производителем набора.