Cinci pași pentru a pregăti înclinările de agar

Agar este o substanță jeleușă derivată din pereții celulari purificați ai algelor roșii. Se adaugă mediilor microbiologice, care sunt materiale pe care microorganismele sunt cultivate în laboratoare, pentru a oferi substanței o structură mai solidă. Agarul nu are valoare nutritivă, așa că atunci când oamenii de știință îl folosesc pentru cultivarea microorganismelor, adaugă diferiți nutrienți pentru a crește creșterea bacteriană în cutii Petri sau eprubete. Când cercetătorii depozitează bacteriile într-o eprubetă, aceasta este denumită înclinare agar, deoarece mediul de creștere a lichidului se solidifică în timp ce tubul este în poziție înclinată. Un vârf cu șurub de pe înclinare împiedică uscarea agarului.

Mediul este pregătit diferit pentru înclinări decât vasele Petri. Sterilizarea se face cu agarul din tuburi; vasele Petri sunt pre-sterilizate înainte ca agarul sterilizat să fie turnat în ele. Măsurați cantitatea de apă necesară și puneți-o într-un balon Erlenmeyer. Încălziți-l pe un aragaz până aproape că fierbe. Adăugați alte ingrediente dacă este necesar și amestecați amestecul încet și constant până se dizolvă. Aceste ingrediente pot include extract de carne de vită, peptonă și tampoane de pH, în funcție de tipul de microorganism cultivat.

Înainte de a adăuga pudra de agar deshidratată, amestecați-o cu o cantitate mică de apă distilată rece pentru a preveni aruncarea. Aveți grijă atunci când adăugați agar la lichidul fierbinte, deoarece poate spuma și revărsa oala. Adăugați cantități mici de agar la un moment dat și amestecați pentru a distribui uniform agarul. Opriți focul când amestecul începe să se aburească, înainte de a fierbe.

Așezați eprubetele neacoperite pe un raft pentru eprubete. Umpleți eprubetele transferând aproximativ 5 mililitri - aproximativ 0,17 uncii sau 1 linguriță - de agar topit din oală folosind o pipetă sterilă. Închideți în mod liber fiecare dintre eprubete, deoarece agar nu va fi sterilizat dacă sunt sigilate bine. Sterilizați toate tuburile într-o autoclavă timp de aproximativ 25 de minute la 121 de grade Celsius sau 250 de grade Fahrenheit.

Când agarul este încă fierbinte, înclinați cu grijă raftul care ține eprubetele pe o suprafață solidă sau a carte groasă, asigurându-vă că mediul din interiorul tuburilor este într-o poziție înclinată față de test tuburi. Lăsați mediul să se răcească și să se solidifice în acest unghi, ceea ce crește suprafața agarului. Strângeți capacele eprubetelor după răcirea agarului. Slanturile sunt gata de utilizare odată ce agarul s-a solidificat. Pot fi depozitate la temperatura camerei sau în frigider pentru utilizare ulterioară.

Inoculați înclinarea prin transferarea celulelor cu o buclă de inoculare dintr-un microorganism cu o singură colonie pe o placă pe suprafața înclinării. Mutați bucla pe suprafața înclinării și refaceți tuburile. Incubați înclinarea până când există dovezi de creștere, apoi puneți tubul la frigider.

  • Acțiune
instagram viewer