În timpul cromatografiei în strat subțire, un tehnician plasează pete ale unui amestec chimic pe o placă plană acoperită cu un strat de material absorbant, apoi așează porțiunea inferioară a plăcii în solvent. Pe măsură ce solventul se deplasează în sus pe placă, substanțele chimice din amestec se ridică cu ea la viteze diferite, astfel încât acestea se separă. Acest test determină ce substanțe chimice se află într-un amestec, comparând ratele de deplasare ale necunoscutelor cu standardele cunoscute. Rezultatele, cu toate acestea, pot fi afectate de mulți factori.
TL; DR (Prea lung; Nu am citit)
Valorile factorului de retenție în cromatografia în strat subțire sunt afectate de absorbant, solvent, placa de cromatografie în sine, tehnica de aplicare și temperatura solventului și a plăcii.
Factori de retenție
Factorul de retenție pentru o substanță chimică în timpul cromatografiei în strat subțire este o măsură a cât de mult se deplasează în sus pe placă ca răspuns la mișcarea solventului. Deoarece mișcarea absolută a substanței chimice depinde de cât de departe se deplasează solventul, calculați valorile factorului de retenție în raport cu gradul de mișcare a solventului. Factorul de retenție pentru o substanță chimică este distanța verticală deplasată de substanța chimică de la locul în care a fost aplicat inițial pe placă, împărțit la distanța parcursă de solvent - măsurată de la același start punct.
Placă de cromatografie cu strat subțire
Placa de cromatografie cu strat subțire în sine poate afecta valoarea factorului de retenție obținută pentru o substanță chimică dată. Plăcile de cromatografie în strat subțire pot fi acoperite cu o varietate de solide absorbante; cel mai frecvent silice sau alumină. Deoarece factorul de retenție se bazează pe afinitatea relativă a substanței chimice pentru absorbant în comparație cu solventul, schimbarea absorbantului poate schimba foarte mult factorul de retenție. De asemenea, grosimea și uniformitatea stratului de absorbant pot varia de la o placă la alta, mai ales dacă sunt realizate manual. Acești factori pot modifica, de asemenea, valoarea factorului de reținere pentru substanțele chimice.
Factori de retenție a impactului solventului
Deoarece solventul transportă substanța chimică în sus pe placă, solventul particular utilizat va avea, de asemenea, un impact substanțial asupra valorii factorului de reținere a substanței chimice. Un solvent care are o interacțiune mai puternică pentru o anumită substanță chimică va depăși mai ușor orice afinitatea substanței chimice pentru stratul absorbant și deplasați-o mai departe într-o perioadă dată de timp. Amestecurile de solvenți pot avea, de asemenea, efecte diferite în funcție de proporția fiecărui solvent.
Alti factori
Există câțiva alți factori care pot afecta factorul de retenție în unele cazuri. Temperatura solventului și a plăcii poate aduce modificări ușoare, deoarece, de exemplu, solventul poate dizolva mai bine substanțele chimice pe care le transportă la temperaturi mai ridicate. Tehnica tehnicianului în aplicarea eșantionului pe placă poate schimba, de asemenea, factorul de reținere. Aplicarea unui eșantion prea mare poate duce la deplasarea unor benzi mari și difuze de substanțe chimice în sus pe placă, ceea ce face dificilă măsurarea cu precizie a distanței care a fost transportată.