Când testați efectul pH-ului asupra activității enzimei, ar trebui să modificați pH-ul. Cu toate acestea, puteți face acest lucru în moduri bune sau rele. Rețineți ce factori suplimentari pot confunda efectele pH-ului variabil. În caz contrar, rezultatele obținute nu pot fi cauzate de modificarea pH-ului, ci de un alt factor. Știind cum să variați corect pH-ul și ce factori confundă pH-ul unui experiment, vă vom ajuta să obțineți rezultate bune și să înțelegeți de ce rezultatele dvs. nu pot fi exact ceea ce vă așteptați.
Schimbați un singur lucru
Când testați efectul pH-ului asupra activității enzimei, variați doar pH-ul, menținând alți factori constanți. Acești alți factori includ concentrația enzimei, concentrația substratului și temperatura. Factorii care rămân constanți se numesc variabile de control. Variabilele de control vă permit să concluzionați că rezultatele activității enzimatice obținute în experimentul dvs. se datorează variației pH-ului, variabila independentă. Știind ce factori nu trebuie schimbați într-un experiment este la fel de important ca să știi ce factor să variezi, în caz contrar, va fi dificil să se concluzioneze dacă rezultatele se datorează de fapt singurului lucru care a fost testat.
Alegeți un acid sau o bază
PH-ul unei soluții poate fi modificat prin dizolvarea diferitelor cantități de acid sau bază în apă. O modalitate de a testa efectul pH-ului asupra activității enzimei este să adăugați treptat picături de acid puternic sau de bază puternică în soluția care conține enzima, apoi observați punctul în care activitatea enzimei încetinește sau se oprește. Un acid este definit ca un compus care donează un ion hidrogen, numit proton (H +), iar o bază este definită ca un compus care donează un ion hidroxid (-OH). Acizi și baze diferite au un număr diferit de protoni sau ioni hidroxid de dat. Nu toți protonii sau ionii hidroxid sunt donați imediat când se adaugă un acid sau o bază la o soluție, dar numărul de protoni sau ioni hidroxid donați modifică pH-ul la viteze diferite. Astfel, este o idee bună să variați pH-ul într-un experiment enzimatic folosind un singur tip de acid sau un tip de bază. În caz contrar, alte variabile sunt adăugate neintenționat.
Țesuturile schimbă și pH-ul
Unele experimente de laborator care studiază activitatea enzimei implică măcinarea țesuturilor proaspete pentru a elibera enzimele din celule și apoi adăugarea de substrat pentru a măsura activitatea enzimei. Țesutul proaspăt conține sânge. Datorită prezenței enzimelor în sânge care schimbă dioxidul de carbon gazos care este dizolvat în sânge în acid carbonic, țesutul în sine poate afecta pH-ul. Astfel, în experimentele care implică activitate enzimatică în țesutul proaspăt, este util să spălați sângele într-un pahar cu apă rece înainte de a măcina țesutul. Acest lucru va reduce la minimum modificarea neintenționată a pH-ului datorată țesutului, astfel încât să poată fi studiată modificarea intenționată a pH-ului.
Păstrați dimensiunile la fel
Așa cum s-a discutat mai sus, concentrația enzimei este un factor de control care nu trebuie modificat atunci când se testează efectul pH-ului asupra activității enzimei. Cu toate acestea, procedurile experimentale variază în mod inerent concentrația enzimatică în moduri subtile. Dacă se folosește o soluție pură de enzime, atunci se menține constantă concentrația enzimei. Cu toate acestea, în experimentele în care enzima provine din țesut proaspăt, cum ar fi bucăți de cartof, bucăți de plante sau bucăți de ficat, dimensiunea bucăților schimbă cantitatea de enzimă din fiecare eprubetă. Astfel, va fi util să tăiați bucățile de țesut cât mai uniform posibil. Acesta este un alt exemplu al modului în care cunoașterea a ceea ce nu trebuie schimbat și motivul pentru care este greu să nu se evite schimbarea completă, ajută la interpretarea rezultatelor variației unui factor, cum ar fi pH-ul.