HPLC oferă o metodă rapidă, automată și extrem de precisă pentru a identifica anumite componente chimice dintr-o probă, dar poate fi costisitoare, complexă și nu funcționează pentru toate probele. Laboratoarele medicale, criminalistice, de mediu și de fabricație folosesc tehnica pentru a cuantifica și separa substanțele chimice dintr-o probă. HPLC are atât avantaje, cât și dezavantaje în comparație cu alte tehnici.
HPLC și tehnici similare
Ca și alte forme de cromatografie, HPLC permite separarea constituenților chimici prin utilizarea unei faze mobile și a unei faze staționare. Faza mobilă este lichidă și faza staționară solidă. Deoarece diferitele componente se mișcă la viteze diferite, se separă între ele. Tehnicile alternative includ electroforeza capilară, în care substanțele migrează prin soluții într-un aparat electric pe câmp și alte metode cromatografice, cum ar fi extracția în fază solidă, cromatografia de gaze și stratul subțire cromatografie.
Viteză, eficiență și precizie
Comparativ cu alte tehnici cromatografice, cum ar fi TLC, HPLC este extrem de rapid și eficient. Folosește o pompă, mai degrabă decât gravitația, pentru a forța un solvent lichid printr-un material adsorbant solid, cu diferite componente chimice care se separă pe măsură ce se deplasează la viteze diferite. Procesul poate fi finalizat în aproximativ 10 până la 30 de minute și oferă o rezoluție ridicată. Este precis și foarte reproductibil. Deoarece este în mare măsură automatizată, rulările HPLC de bază pot fi efectuate cu un antrenament minim.
Cost și complexitate
În ciuda avantajelor sale, HPLC poate fi costisitoare, necesitând cantități mari de produse organice scumpe. Tehnici precum extracția în fază solidă și electroforeza capilară pot fi mai ieftine și chiar mai rapide, în special pentru analize în cadrul unor bune practici de fabricație. Deși este relativ ușor de utilizat metodele HPLC existente, poate fi complex să rezolvați problemele sau să dezvoltați noi metode. Acest lucru se datorează în mare parte gamei de module, coloane și faze mobile diferite.
Sensibilitate și rezoluție
În general, HPLC este versatil și extrem de precis atunci când vine vorba de identificarea și cuantificarea componentelor chimice. Cu mulți pași implicați, precizia HPLC se reduce în mare măsură la procesul automatizat și, prin urmare, foarte reproductibil. HPLC are o sensibilitate scăzută pentru anumiți compuși, iar unii nu pot fi detectați, deoarece sunt adsorbiți ireversibil. Substanțele volatile sunt mai bine separate prin cromatografie gazoasă.