Cientistas e pesquisadores estudam o crescimento bacteriano preparando culturas em laboratório. Placas de Petri contendo ágar nutriente cultivam culturas bacterianas a partir de uma única passada ou inoculação. Os alunos podem preparar ágar nutritivo em casa usando suprimentos de mercearias ou lojas de alimentos naturais para um projeto de feira de ciências. Os eletrodomésticos convencionais e os utensílios básicos de cozinha fornecem as ferramentas para preparar um meio de cultura estéril que pode ser dispensado em placas de Petri. Seguir técnicas estéreis aquecendo os materiais e mantendo as superfícies limpas e secas aumentará os resultados, evitando que o mofo e as partículas contaminem a cultura.
Coloque um filtro de café em uma peneira e pendure a peneira sobre a abertura da tigela transparente.
Despeje lentamente o caldo no filtro, certificando-se de que o caldo não transborde das laterais do filtro. Se o filtro ficar entupido com partículas, remova o filtro usado, substitua por um filtro limpo e continue despejando o caldo.
Remova a peneira e o filtro do topo da tigela e observe se o caldo parece claro (ou seja, não há partículas suspensas no líquido). Se houver partículas flutuando no líquido, repita as etapas 1 e 2 usando uma segunda tigela transparente e um filtro de café fresco.
Coloque a panela no fogão e despeje o caldo claro na panela.
Adicione 16 onças de água destilada à panela que contém o caldo.
Ligue o fogão e ajuste o fogo para médio-baixo. Aqueça o caldo até ferver (ou seja, pequenas bolhas aparecem perto da lateral da panela).
Adicione 1 colher de chá do pó de ágar-ágar ao caldo fervente (aproximadamente 2,5 gramas) e agite a mistura até que o pó esteja dissolvido. Certifique-se de mexer o pó para dissolver e evitar que a gelatina afunde para o fundo da panela (onde pode queimar).
Repita a Etapa 7 até que todo o pó de ágar-ágar tenha sido dissolvido no caldo.
Continue mexendo o caldo por cerca de 1 minuto para garantir que todo o pó esteja completamente dissolvido.
Desligue o fogão, coloque a tampa na panela e deixe o líquido esfriar por pelo menos 15 minutos.
Organize as placas de Petri estéreis em uma fileira para facilitar a montagem, mas não remova as tampas. Se desejar, coloque um tripé para segurar a panela quente. Se você estiver usando copos de creme com tampa em vez de placas de Petri, esterilize os copos de creme colocando os copos e as tampas invertido (de cabeça para baixo) em uma assadeira coberta com papel alumínio e asse no forno por pelo menos uma hora a 375 graus Fahrenheit. Certifique-se de que os copos e tampas esterilizados estejam completamente resfriados antes de usar.
Toque com cuidado a parte externa da panela para verificar se está quente ao toque e coloque a panela sobre o tripé. Se a panela estiver quente demais para tocar, espere pelo menos 10 minutos para que esfrie.
Remova a tampa e reserve. Coloque a concha na panela.
Remova a tampa de uma das placas de Petri e dispense o caldo nutriente para encher a placa até a metade. Cubra o prato imediatamente com a tampa.
Repita a Etapa 14 para cada uma das placas de Petri.
Deixe o caldo nutriente solidificar nas placas de Petri por pelo menos 1 hora, sem perturbações.
Agite suavemente as placas de Petri de um lado para o outro para verificar se o caldo nutriente solidificou completamente. Se o caldo não estiver completamente gelificado, espere mais 20 minutos antes de verificar novamente.
Cubra uma mesa ou superfície plana com um rolo de toalhas de papel para criar uma área de trabalho esterilizada. Rasgue uma folha de papel toalha e dobre-a quatro vezes para criar um chumaço grosso e retangular. Defina este chumaço em uma extremidade da área de trabalho.
Transfira uma placa de Petri para a área de trabalho esterilizada e remova a tampa. Vire o prato com cuidado e coloque uma das extremidades na lateral do maço dobrado, de modo que fique invertido e ligeiramente inclinado (com uma pequena folga pelo maço de papel toalha).
Vire a tampa e coloque-a acima da placa de Petri na superfície de trabalho estéril. Se gotas de água aparecerem na tampa, sacuda suavemente a umidade antes de colocar na superfície coberta, mas não toque na parte interna da tampa.
Repita as etapas 19 e 20 para cada placa de Petri, posicionando um lado da placa invertida na lateral da placa anterior, em vez do chumaço de papel-toalha. Os pratos aparecerão como um conjunto escalonado, com aberturas de um lado para que o excesso de umidade possa evaporar.
Observe as placas de Petri invertidas para verificar se a umidade nas laterais das placas evaporou. Assim que toda a umidade for removida, vire as placas com o lado direito para cima e cubra imediatamente com as tampas para uso.
Inocular o ágar nutriente na placa passando um cotonete contendo a cultura desejada na superfície do ágar nutriente antes de cobrir com a tampa. Vire a placa de Petri de modo que o sólido fique por cima. Armazene a placa de Petri inoculada com o sólido na parte superior para cultura e a tampa na parte inferior para coletar qualquer umidade, partículas soltas ou crescimento.
Coisas que você precisa
- Filtros de café
- Filtro
- 2 tigelas grandes e transparentes
- 16 oz. caldo de carne sem gordura
- 16 oz. água destilada
- Panela com tampa
- Forno
- 10 gramas de ágar ágar
- Colher de medida
- Agitador
- Rolo de papel toalha
- Porta-panelas
- Concha de metal
- Placas de Petri esterilizadas ou copos de creme transparentes com tampas
- Opcional: cronômetro, tripé, forno, frigideira, papel alumínio, frigideira
Pontas
Se houver umidade excessiva nas tampas, seque e esterilize as tampas no forno ajustado para 375 graus Fahrenheit por pelo menos 1 hora (certifique-se de colocar as tampas em uma panela limpa forrada com papel alumínio antes de colocá-las no forno).
Avisos
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Tenha cuidado ao manusear a panela quente para evitar queimaduras. Se a lateral da panela estiver muito quente, o líquido na panela está muito quente. O caldo de nutrientes deve estar quente para dispensar nas placas, mas não muito quente para produzir condensação excessiva nas placas de Petri durante o resfriamento e a configuração.
Não toque no interior da placa de Petri (ou seja, placa ou tampa) para evitar a introdução de bactérias indesejadas na cultura.