O teste de Western blot, também chamado de immunoblotting, é um teste para uma proteína específica dentro de uma mistura de proteínas. O teste Western blot é realizado após a eletroforese em gel ou um teste de imunoabsorção enzimática (ELISA) e usa anticorpos para identificar proteínas específicas.
Eletroforese em gel de poliacrilamida com dodecilsulfato de sódio (SDS-PAGE) é um teste comum usado para separar proteínas para uso no Western blot. As proteínas são separadas por peso e propriedades elétricas à medida que se movem através de uma matriz de gel.
O teste ELISA usa enzimas ou anticorpos ligados a uma superfície sólida para criar a superfície de teste. Uma amostra é então adicionada à superfície de teste. Anticorpos ou enzimas que reagem ou se ligam a proteínas indicam um resultado positivo.
O teste de Western blot é realizado após a eletroforese em gel. As proteínas separadas são transferidas (ou manchadas) em nitrocelulose ou membranas de náilon e identificadas por anticorpos específicos que são marcados por uma proteína secundária.
O teste de Western blot é usado para confirmar resultados positivos de testes de eletroforese em gel ou ELISA. O teste de Western blot pode identificar proteínas mais especificamente e pode descartar falsos positivos.