Microbiologistas, geneticistas e biólogos moleculares usam culturas bacterianas para descobrir os segredos da vida. Microbiologistas estudam bactérias para descobrir novos antibióticos para o tratamento de infecções. Os geneticistas usam bactérias para determinar se os produtos químicos podem ter propriedades cancerígenas. Os biólogos moleculares estudam as vias bioquímicas dos processos celulares para compreender as funções das enzimas que temos em comum com as bactérias. Por mais variados que sejam os estudos, todas as três ciências isolam culturas bacterianas usando a mesma técnica: estrias em placa de ágar.
Noções básicas de micróbio
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Micróbios são organismos unicelulares, como bactérias e fungos. Esses organismos se reproduzem rapidamente e são fáceis de cultivar, o que os torna especialmente úteis para o estudo. Quando um micróbio potencialmente novo é descoberto na natureza, uma amostra é colocada em um meio de crescimento chamado "caldo". Caldos consistem em água esterilizada, sais, açúcares e outros nutrientes que irão promover o rápido crescimento bacteriano em um frasco durante incubação. No entanto, na maioria das vezes, o caldo contém mais de um tipo de bactéria. Para isolar uma única bactéria, o cientista espalha uma pequena amostra do caldo sobre uma placa de ágar semissólida usando uma técnica microbiana chamada "streaking".
Placas de ágar
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As placas de ágar são géis semitransparentes e semissólidos constituídos por algas marinhas e concentrações específicas de nutrientes. A utilidade do ágar reside no fato de que ele fornece uma superfície lisa e macia para o crescimento de bactérias. Quando um cientista coloca uma única bactéria no ágar, ela se reproduz dobrando-se milhares de vezes e aparece como uma pequena colônia de células únicas.
Ferramentas para estrias de bactérias
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A eliminação de bactérias requer três ferramentas: uma placa de ágar, um queimador de álcool e uma alça de arame. A placa de ágar é o meio de crescimento para o qual as bactérias são transferidas após o crescimento em caldo. O queimador de álcool é uma pequena lâmpada cheia de álcool para esterilizar o arame - um cabo longo e fino com um pequeno arame resistente ao fogo preso em uma das pontas. A alça reterá uma pequena gota de caldo cheio de bactérias ao transferir as bactérias do caldo para a placa de ágar.
Processo de estrias de bactérias
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Espalhar bactérias em uma placa de ágar é simples, mas você deve executar esta etapa corretamente ou não isolará colônias separadas. Aqueça a alça sobre o queimador de álcool para esterilizar o fio e mergulhe a ponta da alça no caldo. Passe a ponta da alça para frente e para trás várias vezes sobre um quarto da placa de ágar. Esterilize o loop novamente e passe-o perpendicularmente às primeiras listras. Mova o laço para frente e para trás algumas vezes sobre uma nova seção da placa. Esterilize a ponta. risque levemente a última seção listrada uma vez e mova o loop para frente e para trás várias vezes. As estrias estão diluindo a gota inicial de caldo a um ponto em que as últimas estrias conterão colônias únicas. Coloque a placa em uma incubadora ou em uma mesa em temperatura ambiente e espere que as colônias cresçam durante a noite. Colônias únicas na última linha se tornarão colônias isoladas de uma única bactéria.