HPLC oferece um método rápido, automatizado e altamente preciso para identificar certos componentes químicos em uma amostra, mas pode ser caro, complexo e não funciona para todas as amostras. Laboratórios médicos, forenses, ambientais e de manufatura usam a técnica para quantificar e separar os produtos químicos em uma amostra. HPLC tem vantagens e desvantagens em comparação com outras técnicas.
HPLC e técnicas semelhantes
Como outras formas de cromatografia, o HPLC permite a separação de constituintes químicos por meio do uso de uma fase móvel e uma fase estacionária. A fase móvel é líquida e a fase estacionária é sólida. Como os diferentes componentes se movem em velocidades diferentes, eles se separam. Técnicas alternativas incluem eletroforese capilar, onde as substâncias migram através de soluções em um sistema elétrico campo, e outros métodos cromatográficos, como extração em fase sólida, cromatografia gasosa e camada fina cromatografia.
Velocidade, eficiência e precisão
Comparado a outras técnicas cromatográficas, como TLC, o HPLC é extremamente rápido e eficiente. Ele usa uma bomba, em vez da gravidade, para forçar um solvente líquido através de um material adsorvente sólido, com diferentes componentes químicos se separando à medida que se movem em velocidades diferentes. O processo pode ser concluído em cerca de 10 a 30 minutos e oferece alta resolução. É preciso e altamente reproduzível. Por ser amplamente automatizado, as execuções básicas de HPLC podem ser realizadas com o mínimo de treinamento.
Custo e Complexidade
Apesar de suas vantagens, o HPLC pode ser caro, exigindo grandes quantidades de orgânicos caros. Técnicas como extração em fase sólida e eletroforese capilar podem ser mais baratas e ainda mais rápidas, especialmente para análises em boas práticas de fabricação. Embora seja relativamente fácil usar os métodos de HPLC existentes, pode ser complexo solucionar problemas ou desenvolver novos métodos. Isso se deve em grande parte à variedade de diferentes módulos, colunas e fases móveis.
Sensibilidade e Resolução
Em geral, o HPLC é versátil e extremamente preciso quando se trata de identificar e quantificar componentes químicos. Com muitas etapas envolvidas, a precisão do HPLC depende em grande parte do processo ser automatizado e, portanto, altamente reproduzível. HPLC tem baixa sensibilidade para certos compostos, e alguns não podem ser detectados porque são irreversivelmente adsorvidos. As substâncias voláteis são melhor separadas por cromatografia gasosa.
