Quando você muda de baixa potência para alta potência em um microscópio, a lente objetiva de alta potência se move diretamente sobre a amostra e a lente objetiva de baixa potência gira para longe da amostra. Esta mudança altera a ampliação de uma amostra, a intensidade da luz, a área do campo de visão, a profundidade de campo, a distância de trabalho e a resolução. A imagem deve permanecer em foco se as lentes forem de alta qualidade.
Mudança na ampliação
Mudar de potência baixa para potência alta aumenta a ampliação de uma amostra. A quantidade de ampliação de uma imagem é igual à ampliação da lente ocular, ou ocular, multiplicada pela ampliação da lente objetiva. Normalmente, a lente ocular tem uma ampliação de 10x. Um microscópio óptico padrão com qualidade de laboratório típico geralmente tem quatro lentes objetivas, indo de uma potência baixa de 4x a uma potência alta de 100x. Com um poder ocular de 10x, isso dá ao microscópio óptico padrão uma faixa de ampliação geral de 40x a 1000x.
Diminui a intensidade da luz
A intensidade da luz diminui à medida que a ampliação aumenta. Existe uma quantidade fixa de luz por área, e quando você aumenta a ampliação de uma área, você olha para uma área menor. Portanto, você vê menos luz e a imagem fica mais escura. O brilho da imagem é inversamente proporcional ao quadrado da ampliação. Dado um aumento de quatro vezes na ampliação, a imagem ficará 16 vezes mais escura.
Campo de visão
Aumentar a potência em um microscópio diminui a área do campo de visão. O campo de visão é inversamente proporcional à ampliação da lente objetiva. Por exemplo, se o diâmetro do seu campo de visão for 1,78 milímetros sob a ampliação de 10x, uma objetiva de 40x terá um quarto da largura, ou cerca de 0,45 milímetros. O espécime parece maior com uma ampliação maior porque uma área menor do objeto é espalhada para cobrir o campo de visão do seu olho.
Profundidade de Campo
A profundidade de campo é uma medida da espessura de um plano de foco. Conforme a ampliação aumenta, a profundidade de campo diminui. Em uma ampliação baixa, você pode ser capaz de ver todo o volume de um paramécio, por exemplo, mas quando você aumenta a ampliação, pode ser capaz de ver apenas uma superfície do protozoário.
Distância de trabalho
A distância de trabalho é a distância entre a amostra e a lente objetiva. A distância de trabalho diminui à medida que você aumenta a ampliação. A lente objetiva de alta potência deve estar muito mais próxima da amostra do que a lente objetiva de baixa potência para focar. A distância de trabalho é inversamente proporcional à ampliação.
Imersão em óleo
Os microscópios aumentam a aparência de um objeto ao dobrar a luz. Maior ampliação significa que a luz é mais dobrada. Em um determinado ponto, a luz é dobrada tanto que não consegue passar pela lente objetiva. Nesse ponto - geralmente cerca de 100x para microscópios de laboratório padrão - você precisará colocar uma gota de óleo entre a amostra e a lente objetiva. O óleo "desdobra" a luz para esticar a distância de trabalho e possibilitar a imagem em grandes ampliações.