Techniki izolacji dla płyty smugowej

Chociaż nie widać ich gołym okiem, bakterie są wszędzie. Występują w żywności, glebie, wodzie, powierzchniach w naszych domach oraz w naszych ciałach i na nich. Bakterie na ogół występują w populacjach mieszanych. Wyizolowanie określonej bakterii z innych gatunków bakterii w danej próbce pozwala mikrobiologom na zbadanie jej struktury i funkcji, charakterystyk wykorzystanych do jej identyfikacji. Mikrobiolodzy często izolują bakterie za pomocą jednej z kilku technik płytek smugowych.

Do przenoszenia mikroorganizmów stosuje się ezę do zaszczepiania. Składa się z drutu nichromowego lub platynowego z małą, okrągłą pętlą na jednym końcu. Drugi koniec jest prosty i wsuwa się w uchwyt. Dostępne są również plastikowe jednorazowe ezy do zaszczepiania. Bakterie można wyizolować tylko wtedy, gdy rosną. Mikrobiolodzy hodują bakterie do izolacji płytek na płytkich, okrągłych szalkach Petriego wypełnionych stałym podłożem, zwanym agarem. Agar naśladuje środowisko, w którym bakterie naturalnie rosną. Naczynia wypełnione pożywką są sterylne i przykryte pokrywkami, aby zapobiec wzrostowi niepożądanych organizmów. Podczas izolowania płytki posiewowej eza do zaszczepiania jest wielokrotnie sterylizowana w płomieniu palnika Bunsena.

Najpopularniejszą metodą izolowania określonych bakterii z próbki zawierającej mieszaninę mikroorganizmów jest technika płytek smugowych. Technika zasadniczo rozrzedza liczbę organizmów i zmniejsza ich gęstość. Pozwala mikrobiologom odróżnić i wyizolować pojedyncze kolonie bakteryjne. Kolonia to widoczne skupisko bakterii. Wszystkie bakterie w jednej kolonii pochodzą z tej samej komórki bakteryjnej. W konsekwencji pojedyncze kolonie są koloniami „czystymi”. Czysta kolonia jest przenoszona na inną płytkę w celu wytworzenia czystej kultury składającej się z jednego rodzaju bakterii.

Po prawidłowym wykonaniu izolacja płytek rozmazowych rozrzedza próbkę i umożliwia poszczególnym komórkom bakteryjnym rozwinięcie się w izolowane kolonie. Mikrobiolog zaczyna od sterylizacji ezy w płomieniu. Schładza ezę, dotykając nią agaru, a następnie zanurza ezę w próbce i rozprowadza ją tam iz powrotem, aby pokryć część płytki. Sterylizuje ezę, schładza ją i przeciąga drugą, sąsiednią część płytki kilkakrotnie przeprowadź pętlę przez pierwszą sekcję i zakryj drugą sekcję za pomocą zygzaka ruch. To pobiera niewielką liczbę bakterii z pierwszej sekcji i przenosi je do drugiej sekcji. Liczba powtórzeń tej podstawowej procedury zależy od zastosowanej metody płytki smugowej. Pomimo zastosowanej metody, oryginalna próbka jest używana tylko do zaszczepienia pierwszej sekcji płytki.

Metody płytek posiewowych różnią się w zależności od liczby posianych skrawków agaru. Metoda T-streak wykorzystuje trzy sekcje: górną połowę i dwie równej wielkości sekcje dolne. Początkowe inokulum umieszcza się w górnej połowie płytki. Bakterie są przeciągane z górnej części do jednej z dolnych części, a następnie z dolnej części do drugiej. W metodzie kwadrantu smugami są cztery jednakowe sekcje. Metoda ciągłego smużenia zazwyczaj polega na zaszczepieniu górnej połowy płytki i obróceniu jej o 180 stopni, oraz zaszczepienie drugiej połowy szalki bez sterylizacji ezy lub wyciągania bakterii z poprzedniej Sekcja.