Pięć kroków do przygotowania skosów agarowych

Agar jest galaretowatą substancją pochodzącą z oczyszczonych ścian komórkowych czerwonych alg. Dodawany jest do pożywek mikrobiologicznych, czyli materiałów, na których w laboratoriach hoduje się mikroorganizmy, aby nadać substancji bardziej solidną strukturę. Agar nie ma wartości odżywczej, więc kiedy naukowcy używają go do hodowli mikroorganizmów, dodają różne składniki odżywcze, aby zwiększyć wzrost bakterii na szalkach Petriego lub probówkach. Gdy badacze przechowują bakterie w probówce, określa się to mianem skosu agarowego, ponieważ płynna pożywka wzrostowa krzepnie, gdy probówka jest przechylona. Zakrętka na skosie zapobiega wysychaniu agaru.

Pożywka jest inaczej przygotowana na skosy niż szalki Petriego. Sterylizacja odbywa się z agarem w probówkach; Szalki Petriego są wstępnie sterylizowane przed wlaniem do nich sterylizowanego agaru. Odmierz potrzebną ilość wody i wlej ją do kolby Erlenmeyera. Podgrzej na kuchence, aż prawie się zagotuje. W razie potrzeby dodaj inne składniki i mieszaj powoli i ciągle, aż się rozpuszczą. Te składniki mogą obejmować ekstrakt wołowy, pepton i bufory pH, w zależności od rodzaju hodowanego mikroorganizmu.

Przed dodaniem odwodnionego agaru w proszku wymieszaj go z niewielką ilością zimnej wody destylowanej, aby zapobiec zbrylaniu. Zachowaj ostrożność podczas dodawania agaru do gorącego płynu, ponieważ może się spienić i przelać garnek. Dodawaj małe ilości agaru na raz i mieszaj, aby równomiernie rozprowadzić agar. Wyłącz ogrzewanie, gdy mieszanina zacznie parować, zanim się zagotuje.

Umieść otwarte probówki na statywie na probówki. Napełnij probówki, przenosząc około 5 mililitrów - około 0,17 uncji lub 1 łyżeczkę - stopionego agaru z doniczki za pomocą sterylnej pipety. Luźno zakryj każdą probówkę, ponieważ agar nie zostanie wysterylizowany, jeśli będą szczelnie zamknięte. Sterylizuj wszystkie probówki w autoklawie przez około 25 minut w 121 stopniach Celsjusza lub 250 stopniach Fahrenheita.

Gdy agar jest jeszcze gorący, ostrożnie przechyl statyw trzymający probówki na twardej powierzchni lub gruba książka, upewniając się, że medium wewnątrz probówek jest ukośne w stosunku do testu rury. Pozwól pożywce ostygnąć i zestalić się pod tym kątem, co zwiększy powierzchnię agaru. Po ostygnięciu agaru dokręć korki probówek. Skosy są gotowe do użycia po zestaleniu się agaru. Można je przechowywać w temperaturze pokojowej lub w lodówce do wykorzystania w przyszłości.

Zaszczepić skos poprzez przeniesienie komórek z ezą do posiewu z drobnoustroju jednokolonowego na płytce na powierzchnię skosu. Przesuń pętlę po powierzchni skosu i zamknij rurki. Inkubuj skos, aż pojawią się oznaki wzrostu, a następnie włóż probówkę do lodówki.

  • Dzielić
instagram viewer