Czym jest zaprawa w mikrobiologii?

Mikrobiologia bada mikroskopijne organizmy i potrzebuje sposobów wizualnego rozróżniania różnych typów. Mikrobiolodzy stosują procedury barwienia, które nadają kolor różnym typom organizmów. Te plamy to chemikalia, które mają różne kolory, ale te chemikalia same w sobie nie przywierają do organizmów. W ten sposób mikrobiolog dodaje do plamy zaprawę. Zaprawa jest klasycznie definiowana jako jon, który wiąże barwnik chemiczny i utrzymuje go tak, że barwnik pozostaje przyklejony do organizmu. Jednak każda substancja chemiczna, która utrzymuje barwnik na miejscu, może być również uważana za zaprawę.

TL; DR (zbyt długi; Nie czytałem)

Zaprawa „utrwala” barwnik w organizmie, dzięki czemu farba pozostaje na swoim miejscu.

W mikrobiologii zaprawa jest związkiem używanym do przytrzymywania cząsteczek plamy na mikroorganizmie. Klasycznie zdefiniowane zaprawy to zazwyczaj jony, takie jak jony metali lub jony halogenkowe, ale mogą to być dowolne molekuły, które służą do utrzymywania barwnika. Jednak cząsteczka zwana fenolem jest niejonową zaprawą, którą omówiono poniżej. Niektóre zaprawy wiążą zarówno barwnik, jak i białka na mikroorganizmie. Większość zapraw to jony, ponieważ ładunek elektryczny jonu przyciąga ładunek elektryczny barwnika chemicznego. Tak więc, gdy jon wiąże barwnik, tworzą duży kompleks, który wytrąca się – co oznacza, że ​​stają się ciałem stałym i nie rozpuszczają się już w roztworze. Zaprawa barwiąca zatrzymuje lub obciąża barwnik, dzięki czemu nie zmywa się podczas pozostałej części procedury barwienia. Płukanie odbywa się w taki sposób, że wizualizowane są tylko rzeczywiste obszary barwienia.

Bardzo powszechnym rodzajem barwienia w mikrobiologii jest barwienie metodą Grama. Bakterie mają ściany komórkowe, które otaczają ich błonę komórkową i zapewniają im fizyczną ochronę. Barwienie Grama rozróżnia bakterie Gram-dodatnie i Gram-ujemne. Bakterie Gram-dodatnie mają grubsze ściany komórkowe niż bakterie Gram-ujemne. Barwienie metodą Grama wykonuje się, gdy barwnik chemiczny, fiolet krystaliczny, miesza się z zaprawą jodową. Jod i fiolet krystaliczny tworzą duży kompleks, który wytrąca się z roztworu. Podczas procedury barwienia bakterie zanurzane są w alkoholu, co powoduje kurczenie się ścian komórkowych. Ten skurcz zatrzymuje kompleks jodu i fioletu krystalicznego w ścianie komórkowej, co nadaje bakteriom Gram-dodatnim purpurowy kolor. .

Innym powszechnym przebarwieniem w mikrobiologii jest barwienie hematoksyliną żelaza. Hematoksyliną barwi DNA w jądrach drobnoustrojów. Hematoksylina żelaza uwidacznia pasożyty w kale ludzi. Żelazo jest zaprawą, która zapobiega wypłukiwaniu hematoksyny podczas procesu barwienia. Jony żelaza są dodawane do hematoksyliny w postaci żelazowego siarczanu amonu i żelazowego siarczanu amonu. Żelazny oznacza, że ​​atom żelaza ma ładunek +2, a żelazowy oznacza, że ​​jon żelaza ma ładunek +3.

Barwienie kwasoodporne służy do wykrywania obecności prątków w plwocinie, która jest mieszaniną śliny i śluzu, który jest odkrztuszony. Chemiczny barwnik fuschin barwi te bakterie, ale fenol – w postaci kwasu karbolowego – jest substancją chemiczną, która utrzymuje fuschin w ścianie komórkowej prątków. Fuschin dobrze rozpuszcza się w fenolu, ale nie w wodzie czy alkoholu. Z kolei fenol dobrze miesza się z woskową ścianą komórkową prątków. Fenol służy więc jako taksówka, która przenosi fuschin do ściany celi. Fenol nie jest jonem metalicznym ani halogenkowym, ale służy jako zaprawa, ponieważ utrzymuje barwnik na miejscu.