Podobnie jak przestrzeganie przepisów na gotowanie pysznych posiłków, pomyślne przeprowadzanie eksperymentów wymaga zwracania uwagi na właściwe mieszanie chemikaliów. Dokonywanie rozwiązań o określonym procencie, np. 1%, jest ważne, jeśli chodzi o powtórzenie eksperymentu i uzyskanie tych samych wyników.
Co to jest BSA?
Słowo bydło oznacza „krowa”, a albumina surowicy bydlęcej (BSA) to białko pochodzące od krów. W szczególności BSA jest rodzajem białka zwanego albuminą, które występuje w dużych ilościach we krwi krów. Krew jest mieszaniną czerwonych krwinek, dlatego krew wygląda na czerwoną, oraz wielu różnych rodzajów białek, które są rozpuszczone w wodzie. Gdyby komórki krwi zostały usunięte, pozostałby przezroczysty płyn, zwany surowicą. Tak więc BSA jest białkiem albuminy, które znajduje się we krwi krów. We krwi zadaniem albuminy jest przenoszenie innych białek z miejsca na miejsce.
Co to jest rozwiązanie 1%?
Słowo „rozwiązanie” opisuje coś, co istnieje jako ciecz. Na przykład zarówno woda, jak i mleko są roztworami. Kiedy mówimy, że roztwór wody zawiera 1% cukru, oznacza to, że 1% cząsteczek w tym roztworze to cząsteczki cukru, podczas gdy pozostałe 99% to cząsteczki wody. Zatem 1% roztwór BSA oznacza, że 1% cząsteczek w tym roztworze to BSA. Ponieważ BSA jest często sprzedawany jako suchy proszek, pewną jego ilość należy odważyć, a następnie rozpuścić w płynie, takim jak woda. Rozpuszczanie proszku BSA w cieczy nazywa się rozcieńczaniem wagowo-objętościowym, często zapisywanym jako „w/v” w instrukcjach towarzyszących chemikaliom lub eksperymentom naukowym.
Dokładne odważanie małych ilości proszku
Proszek BSA jest bardzo lekki i często jest używany w niewielkich ilościach, dlatego naukowcy potrzebują bardzo czułej wagi, aby dokładnie zmierzyć BSA. Naukowcy często nie potrzebują dużych ilości roztworu BSA, więc wyprodukowanie kilku galonów lub litrów na raz byłoby stratą proszku i przestrzeni magazynowej. Eksperymenty z biochemii i biologii molekularnej często wykorzystują niewielkie ilości roztworu BSA i generalnie dobrą praktyką jest każdorazowe przygotowywanie go na świeżo. Prostym sposobem na zrobienie 1% roztworu BSA jest odważenie jednego grama proszku BSA i wlanie go do cylindra miarowego który może pomieścić ponad 100 mililitrów (ml) wody, a następnie dodaj wodę, aż poziom cieczy osiągnie 100 ml znak. Matematycznie jeden podzielony przez 100 równa się 1%.
Wybór odpowiedniego rozpuszczalnika do rozpuszczenia proszku BSA
Nie wszystkie eksperymenty wymagają rozpuszczenia BSA w wodzie, ponieważ czysta woda ma inne właściwości niż płyn płynący w krwiobiegu zwierząt i otaczający komórki na zewnątrz. Płyn wewnątrz zwierząt zawiera pewne ilości soli i kwasów, więc jeśli celem roztworu BSA jest niosąc lek, który będzie wstrzykiwany żywym zwierzętom, proszek BSA należy rozpuścić w specjalnym ciekły. Powszechną cieczą używaną do celów eksperymentalnych jest sól fizjologiczna buforowana fosforanami (PBS). PBS ma właściwości podobne do właściwości płynu w żywych organizmach, takich jak myszy, psy i ludzie, więc może być używany do rozpuszczania BSA i wszelkich substancji chemicznych, które się tam przemieszczają.