Mikroskop świetlny lub złożony jest narzędziem, z którym może się spotkać każdy student biologii. Zrozumienie zalet mikroskopu świetlnego da wgląd w opanowanie jego przydatności w klasie lub klinice. Wiele technik eksperymentalnych, które zostały udoskonalone do użytku z mikroskopem świetlnym, łatwość użycia i jego stosunkowo przystępna cena w porównaniu z innymi typami mikroskopów sprawia, że jest to preferowany wybór dla wielu nauk przyrodniczych Aplikacje.
Mikroskopia świetlna i biologia komórki
Ponieważ komórek nie można oglądać nieuzbrojonym okiem, mikroskopia jest kluczowym elementem badania struktury i funkcji komórek. Mikroskop świetlny wykorzystuje źródło światła do oświetlania preparatu na jasnym polu. Próbka jest barwiona, aby struktury, które są zwykle przezroczyste lub prawie bezbarwne, były ciemniejsze niż tło i łatwiejsze do zobaczenia. Inną techniką mikroskopową jest mikroskopia fluorescencyjna. Zamiast stosowania ciemnego barwnika na jasnym tle, komórki są barwione barwnikami fluorescencyjnymi i oglądane na ciemnym tle.
Opracowano dziesiątki procedur eksperymentalnych
Badanie tkanek pod mikroskopem świetlnym jest praktykowane od ponad 50 lat. Mikroskopia świetlna jest najbardziej dostępną formą mikroskopii na świecie i nadal jedną z głównych narzędzia szkoleniowe dla patologów, czyli lekarzy, którzy diagnozują choroby poprzez badanie tkanek pod mikroskopem Struktura. Tysiące laboratoriów na całym świecie udoskonaliło dziesiątki procedur eksperymentalnych, a wiele z nich jest udostępnianych bezpłatnie. Połączenie niskich kosztów i dużej ilości informacji biologicznych, które dostarcza mikroskop świetlny, czyni go nieocenionym narzędziem w badaniach i medycynie.
Plamy chemiczne i mikroskopia świetlna
Obserwacja próbki pod mikroskopem świetlnym wymaga pomocy kolorowych barwników chemicznych. Te niebieskie, czerwone, zielone i brązowe plamy są utrwalane na tkance za pomocą czystej substancji chemicznej zwanej permount, która twardnieje pod wpływem powietrza. W ten sposób połączone plamy chemiczne i tkanki utrzymują się przez wiele lat bez blaknięcia, co pozwala naukowcom badać ten sam preparat przez długi czas bez utraty koloru. Utrata widoczności jest ograniczeniem mikroskopii fluorescencyjnej, ponieważ barwniki fluorescencyjne z czasem zanikają.
Łatwość powiększania
Zdolność mikroskopu złożonego do łatwego powiększania między obserwacjami ogona małej ryby przy 50-krotnym jej rzeczywisty rozmiar do widzenia tętnic w jego ogonie 400 razy większy niż rzeczywisty rozmiar nie ma sobie równych w przypadku innych typów types mikroskopy. Patolodzy badają biopsje lub małe fragmenty tkanki usunięte igłą pod mikroskopem złożonym i często powiększają i pomniejszają, aby dokonać jak najlepszej oceny. Złożony mikroskop świetlny pozostaje najlepszą opcją do tego typu badań.
Zalety mikroskopii fluorescencyjnej
Mikroskopia fluorescencyjna zapewnia oglądającemu więcej szczegółów wizualnych, ponieważ barwniki fluorescencyjne mogą celować w określone struktury w komórce. Cząsteczki fluorescencyjne w próbce komórki zwane fluoroforami absorbują światło o jednej długości fali i emitują światło o innej długości fali. Barwniki fluorescencyjne można stosować ze specyficznymi białkami i przeciwciałami w celu podkreślenia struktur, a nawet pojedynczych cząsteczek w komórce. Techniki mikroskopii fluorescencyjnej pozwalają na użycie wielu barwników w próbce.
Wada mikroskopów świetlnych
Technologia mikroskopowa eksplodowała w ostatnich dziesięcioleciach, a niektóre z bardziej zaawansowanych mikroskopów dostarczają bardziej szczegółowych informacji niż klasyczny złożony (lekki) mikroskop. Mikroskopy fluorescencyjne pozwalają naukowcom zobaczyć dwa różne białka w tym samym miejscu w komórce za pomocą czerwonych i zielonych markerów, które nakładają się, tworząc żółty kolor. Mikroskopy elektronowe pokazują trójwymiarowe cechy powierzchni komórki. Aby wymienić jedną wadę mikroskopu świetlnego, nie posiada on niektórych zaawansowanych możliwości mikroskopii fluorescencyjnej lub elektronowej, ponieważ wykorzystuje tylko białe światło. Jednak mikroskopy elektronowe i mikroskopy fluorescencyjne wahają się w cenie od kilkudziesięciu tysięcy do setki tysięcy dolarów, podczas gdy mikroskop złożony można obecnie kupić już za $100.