Fem trinn for å forberede Agar Slants

Agar er et geléaktig stoff avledet fra de rensede celleveggene til rødalger. Det tilsettes mikrobiologiske medier, som er materialer som mikroorganismer dyrkes på i laboratorier, for å gi stoffet mer en solid struktur. Agar har ingen næringsverdi, så når forskere bruker den til å dyrke mikroorganismer, tilfører de forskjellige næringsstoffer for å øke bakterieveksten i petriskåler eller reagensglass. Når forskere lagrer bakterier i et prøverør, blir det referert til som en agarhelling fordi det flytende vekstmediet stivner mens røret er i en skråstilling. En skruehettetopp på skråningen forhindrer at agaren tørker ut.

Mediet er tilberedt annerledes for skråstillinger enn petriskåler. Sterilisering gjøres med agaren i rørene; petriskåler er sterilisert før sterilisert agar helles i dem. Mål mengden vann som trengs og legg den i en Erlenmeyer-kolbe. Varm den på komfyr til den nesten koker. Tilsett andre ingredienser om nødvendig og rør blandingen sakte og kontinuerlig til de oppløses. Disse ingrediensene kan omfatte biffekstrakt, pepton og pH-buffere, avhengig av hvilken type mikroorganisme som dyrkes.

Før du tilsetter det dehydratiserte agarpulveret, bland det med en liten mengde kaldt destillert vann for å forhindre klump. Vær forsiktig når du tilsetter agar i den varme væsken, siden den kan skumme og rømme over gryten. Tilsett små mengder agar om gangen og rør for å fordele agaren jevnt. Slå av varmen når blandingen begynner å dampe, før den koker.

Plasser de ikke-lukkede prøverørene på et prøverørstativ. Fyll prøverørene ved å overføre ca. 5 milliliter - ca. 0,17 gram eller 1 ts - av smeltet agar fra potten ved hjelp av en steril pipette. Hett løst på hvert av prøverørene, fordi agaren ikke blir sterilisert hvis de er forseglet tett. Steriliser alle rørene i en autoklav i omtrent 25 minutter ved 121 grader Celsius, eller 250 grader Fahrenheit.

Når agaren fremdeles er varm, vipp stativet forsiktig med prøverørene på en solid overflate eller en tykk bok, og sørg for at mediet inne i rørene er i en skrå stilling i forhold til testen rør. La mediet avkjøles og stivne i denne vinkelen, noe som øker agarets overflate. Stram til lokket på reagensglassene etter at agaren er avkjølt. Skråstillingene er klare til bruk når agaren har størknet. De kan oppbevares ved romtemperatur eller i kjøleskapet for fremtidig bruk.

Inokulere skråstillingen ved å overføre celler med en inokuleringssløyfe fra en enkeltkolonimikroorganisme på en plate til skråflaten. Flytt løkken over overflaten av skråningen og sett rørene på nytt. Inkuber skråstillingen til det er bevis for vekst, og sett deretter røret i kjøleskap.

  • Dele
instagram viewer