Western blot-testen, også kalt immunblotting, er en test for et spesifikt protein i en proteinblanding. Western blot-testen utføres etter gelelektroforese eller en enzymkoblet immunosorbentanalyse (ELISA), og den bruker antistoffer for å identifisere spesifikke proteiner.
Sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) er en vanlig test som brukes til å skille proteiner for bruk i Western blot. Proteinene er atskilt etter vekt og elektriske egenskaper når de beveger seg gjennom en gelmatrise.
ELISA-testen bruker enzymer eller antistoffer festet til en solid overflate for å lage testoverflaten. En prøve tilsettes deretter testflaten. Antistoffer eller enzymer som reagerer eller fester seg til proteiner indikerer et positivt resultat.
Western blot-testen utføres etter gelelektroforese. De separerte proteinene overføres (eller blottes) på nitrocellulose- eller nylonmembraner og identifiseres av spesifikke antistoffer som er merket med et sekundært protein.
Western blot-testen brukes til å bekrefte positive resultater fra enten gelelektroforese eller ELISA-tester. Western blot-testen kan identifisere proteiner mer spesifikt og kan utelukke falske positive.