Næringsagar er en type generelt formål komplekst medium som hovedsakelig brukes til dyrking av en rekke mikroorganismer.
Komplekse medier mikrobiologi snakker, er vekstmedier som er sammensatt av en rekke tilgjengelige næringsstoffer og proteinmolekyler i ukjente konsentrasjoner. Næringsagar brukes til å dyrke ikke-smittende mikrober som bakterier og gjær.
Hva vokser på næringsagar?
Mikroorganismer trenger mat, vann og et passende miljø for å overleve og vokse. Næringsagar gir disse ressursene for mange typer mikrober, fra sopp som gjær og mugg til vanlige bakterier som Streptokokker og Staphylococcus.
Mikrobene som kan dyrkes på komplekse medier som næringsagar kan beskrives som nonfastidious organismer. Nonfastidious organismer er mikrober som er i stand til å vokse og trives uten spesielle ernæringsmessige eller miljømessige forhold.
Noen bakterier kan ikke dyrkes med næringsagarmedium. Kresne organismer (kresne bakterier) kan trenge en veldig spesifikk matkilde som ikke er gitt i næringsagar. Et eksempel på en kjedelig organisme er
Treponema pallidum, bakterier som forårsaker syfilis. Forskere har prøvd uten hell å dyrke denne bakterien i en kultur i over 100 år.Næringsagar kan brukes til å dyrke mikroorganismer til flere formål. Én bruk er dyrking og vedlikehold av spesifikke kolonier av nonfastidious organismer for vitenskapelig studie eller identifisering. En annen bruk er å oppdage og kvantifisere tilstedeværelsen av potensielt skadelig bakterie eller andre mikrober i vann, kloakk, skalldyr, kjøtt, meieriprodukter og andre matvarer.
Mediet må holdes sterilt for å sikre at de eneste mikrober som vokser er de som er beregnet på kultur, og ikke vokser som et resultat av forurensning av mediet.
Næringsstoffer Agar ingredienser
Hoved ingredienser i næringsagar er pepton, biffekstrakt og agar. Disse ingrediensene pulveriseres og tilsettes deretter destillert vann. Den spesifikke sammensetningen av næringsstoff agar kan variere litt avhengig av produsent og kilde til ingrediensene som brukes.
Sammensetningen av det tilberedte næringsagarmediet er 0,5 prosent pepton, 0,3 prosent biffekstrakt (eller gjærekstrakt), 1,5 prosent agar og 0,5 prosent natriumklorid.
Å definere agar
For å definere agar, tenk på et komplekst karbohydrat hentet fra marine rødalger som fungerer som et størkningsmiddel i næringsmediet. Det har ingen næringsverdi for at mikrober skal dyrkes.
Agargeler ved en temperatur på 113 grader Fahrenheit (45 grader Celsius) og smelter ved 203 grader Fahrenheit (95 grader Celsius). Agar inkluderer også varianter av matkvalitet som kan brukes som fortykningsingrediens til supper, gelé og annen mat.
Definisjon av pepton
De definisjon av pepton er et løselig protein dannet i de tidlige stadiene av proteinnedbrytning under fordøyelsesprosessen. Den er laget ved delvis å fordøye proteinmaterialer som kjøtt, gelatin og kasein ved bruk av syrer eller enzymer.
Formålet med pepton i næringsagarmediet er å gi den primære kilden til organisk nitrogen for den voksende mikrobielle kulturen, og det kan også være en kilde til karbohydrater og vitaminer. Den nøyaktige sammensetningen av pepton i næringsmediet vil variere avhengig av proteinkilde og fordøyelsesmetode.
Biffekstrakt
De biffekstrakt brukes til å lage næringsagarmediet er en blanding av vannløselige partikler av dyrevev, karbohydrater, organiske nitrogenforbindelser, vitaminer og salt.
Gjærekstrakt kan også brukes til å lage næringsagar og gir lignende forbindelser. Formålet med forbindelsene i biffekstrakt er å hjelpe til med veksten av bakteriene som dyrkes på næringsagarmediet.
Destillert vann
Destillert vann brukes vanligvis til å lage næringsagarmediet. Destillert vann er vann som er bearbeidet for å fjerne oppløste forurensninger og mineraler.
Det destillerte vannet som er tilstede i næringsagarmedium er nødvendig for livsprosessene til mikroorganismer som vokser der, akkurat som vann er viktig for livsprosessene til alle levende ting. Tilsetningen av natriumklorid til blandingen gjør at kulturmiljøet ligner på cytoplasma.
Klargjøre næringsagarmediet
For å ordentlig tilbered en næringsagarblanding for bakteriekultur er det viktig å henvise til spesifikke instruksjoner gitt av næringsprodusenten. Noen ingredienser eller mengder kan variere litt avhengig av kilden til næringsagaren.
- Oppløs 28 gram næringsagarpulver i en liter destillert vann.
- Varm opp blandingen under omrøring. Fortsett å koke og rør blandingen i omtrent ett minutt eller til alt pulveret er oppløst.
- Autoklaver den oppløste blandingen i 15 minutter ved 249,8 grader Fahrenheit (121 grader Celsius).
- La agarblandingen avkjøles litt. Dispenser i plater eller rør. La stivne.
- Bytt lokk og oppbevar i et kjølig, mørkt og sterilt miljø som kjøleskapet. butikk agarplater (Petriskåler) opp ned for å forhindre kondensdannelse på mediet.
Den endelige pH-verdien til det tilberedte agarmediet til næringsstoffer skal være 6,8. Mediet skal ha en lys gul farge og ha konsistensen av fast gelatin. Tilberedt agarmedium skal vare i kjøleskapet i opptil to år, med mindre det er en markant endring i utseendet på mediet som vil indikere forurensning.