Bakterier dyrkes i petriskåler på et fast medium kjent som bakteriell agar, hvor det dannes hevede, sirkulære kolonier. I motsetning til en individuell bakteriecelle, er en koloni en gruppe bakterier som er store nok til å være synlige for det blotte øye. Bakterievekst kan måles ved enkel observasjon av hvor mange kolonier som er tilstede; Imidlertid inkluderer mer kvantitative metoder bruken av et tellekammer, eller oftere levedyktige platetall. Sistnevnte brukes hyppigst da det også gir kvalitativ informasjon som effekten av varierende vekstbetingelser. Siden det kan være milliarder bakterier i en petriskål, måles først måling av prøven slik at det er mulig å telle antall kolonier.
I et reagensglass tilsettes 10 mikroliter av startbakteriekulturen til 90 mikroliter fortynningsmedium. Lukk lokket på røret og virvle forsiktig for å oppnå en homogen blanding. Nå er prøven en tidel av den opprinnelige konsentrasjonen.
Overfør 10 mikroliter av denne nye prøven til et nytt prøverør som inneholder 90 mikroliter fortynningsmedium, bland det igjen. Nok en gang vil resultatet bli prøven ytterligere fortynnet - nå vil den være en hundredel av den opprinnelige konsentrasjonen. Gjenta dette flere ganger, til den originale prøven er fortynnet mellom 10
4 og 1010 ganger. Forsikre deg om at hvert rør er merket med riktig fortynning, for eksempel 10-1, 10-2 og så videre.Tilsett 10 mikroliter av den siste fortynningen fullført på agarplaten. Ved å spre kanten, fordel bakterieløsningen over hele overflaten av agarplaten. Gjenta dette for to plater til. Det er også vanlig å utføre disse trinnene med andre fortynningsnivåer for sammenligning. Sørg for å merke platene. Sett på lokket på hver plate og la agarplatene tørke i flere minutter, enten på en laboratoriebenk under en flamme eller i en inkubator. Plasser platene i inkubatoren som skal innstilles til riktig temperatur for bakteriestammen. La vokse i 12 til 16 timer.
Kolonier skal være synlige etter 16 timer; Imidlertid kan noen genetiske modifikasjoner kreve lengre tid (for eksempel fargeutvikling). Når kolonier er observerbare, ta ut platene og finn de som har mellom 30 og 300 kolonier. Bruk en permanent markør til å plassere en prikk på bunnen av petriskålen - siden med agaren, ikke lokket - uansett hvor en koloni er synlig gjennom agaren. Tell hver markør. Gjenta for hver tallerken.
For å måle mengden bakterier i startkulturen for dette eksperimentet, må fortynningen reverseres i beregningene to steder. For det første, når du tok en mikroliter fra prøverøret for å sette i petriskålen, tok du en tidel av den fortynnede prøven, så du må multiplisere alt med 10 for å reversere det. I tillegg, hvis fortynningsfaktoren i reagensrøret for eksempel var 10-7, så må antall kolonier multipliseres med 107 for å reversere fortynningseffekten. Bare fjern det negative tegnet fra eksponenten i beregningene. Bruk formelen:
[Antall kolonier som telles] × 10 × [hvor mange ganger prøven må multipliseres for å komme til den opprinnelige konsentrasjonen: for eksempel 105] = Antall kolonidannende enheter (CFU) per milliliter startkultur. Dette er bakterieveksten i petriskålene dine.