Lys- eller sammensatt mikroskop er et verktøy som enhver biologistudent sannsynlig vil møte. Å forstå fordelene med lysmikroskopet vil gi innsikt i å mestre dets nytte for klasserommet eller klinikken. De mange eksperimentelle teknikkene som er blitt perfeksjonert for bruk med et lysmikroskop, dets brukervennlighet og dens relativt rimelig sammenlignet med andre typer mikroskoper gjør det til det foretrukne valget for mange livsvitenskaper applikasjoner.
Lysmikroskopi og cellebiologi
Fordi celler ikke kan sees med det blotte øye, er mikroskopi en nøkkelkomponent for å studere cellestruktur og funksjon. Et lysmikroskop bruker en lyskilde for å belyse prøven på et lyst felt. Prøven er farget for å gjøre strukturer som normalt er gjennomsiktige eller nesten fargeløse mørkere enn bakgrunnen og lettere å se. En annen mikroskopiteknikk er fluorescerende mikroskopi. I stedet for å bruke en mørk flekk på en lys bakgrunn, blir celler farget med fluorescerende fargestoffer og sett på en mørk bakgrunn.
Dusinvis av eksperimentelle prosedyrer utviklet
Å studere vev med lysmikroskopi har vært praktisert i mer enn 50 år. Lysmikroskopi er den mest tilgjengelige formen for mikroskopi rundt om i verden og fortsatt en av de viktigste treningsverktøy for patologer, eller leger som diagnostiserer sykdommer ved å undersøke mikroskopisk vev struktur. Tusenvis av laboratorier over hele verden har perfeksjonert dusinvis av eksperimentelle prosedyrer, og mange av dem gjøres fritt tilgjengelige. Kombinasjonen av lave kostnader og den store mengden biologisk informasjon som et lysmikroskop gir, gjør det til et uvurderlig verktøy for forskning og medisin.
Kjemiske flekker og lysmikroskopi
Å observere et eksemplar under lysmikroskopi krever hjelp av fargerike kjemiske flekker. Disse blå, røde, grønne og brune flekkene er festet på vevet med en klar kjemikalie som kalles permount, som stivner når den utsettes for luft. Kombinert varer disse kjemiske flekkene og vevene i mange år uten å falme, slik at forskere kan undersøke den samme prøven i lang tid uten tap av farger. Tap av synlighet er en begrensning av fluorescensmikroskopi fordi fluorescerende fargestoffer blekner over tid.
Enkel zooming
Evnen til sammensatt mikroskop til å zoome lett mellom å observere halen til en liten fisk på 50 ganger dens faktisk størrelse for å se arteriene i halen til 400 ganger den faktiske størrelsen er uovertruffen av andre typer mikroskop. Patologer undersøker biopsier, eller små biter av vev fjernet av en nål, under et sammensatt mikroskop og zoomer ofte inn og ut for å gjøre den beste vurderingen. Det sammensatte lysmikroskopet er fortsatt det beste alternativet for denne typen forskning.
Fordeler med fluorescerende mikroskopi
Fluorescerende mikroskopi gir større visuelle detaljer for betrakteren fordi fluorescerende fargestoffer kan målrette mot spesifikke strukturer i cellen. Fluorescerende molekyler i celleprøven kalt fluoroforer absorberer lys i en bølgelengde og avgir lys med en annen bølgelengde. Fluorescerende fargestoffer kan brukes med spesifikke proteiner og antistoffer for å markere strukturer og til og med enkeltmolekyler i cellen. Fluorescerende mikroskopiteknikker tillater at flere fargestoffer brukes i en prøve.
Ulempen med lysmikroskop
Mikroskopiteknologi har eksplodert de siste tiårene, med noen av de mer avanserte mikroskopene som gir mer detaljert informasjon enn det klassiske sammensatte (lys) mikroskopet. Fluorescerende mikroskop lar forskere se to forskjellige proteiner på samme sted i en celle ved hjelp av røde og grønne markører som overlapper hverandre for å danne en gul farge. Elektronmikroskop viser de tredimensjonale egenskapene til en celleoverflate. For å nevne en ulempe med lysmikroskopet, har det ikke noen av de avanserte mulighetene med fluorescerende eller elektronmikroskopi fordi det bare bruker hvitt lys. Elektronmikroskoper og fluorescerende mikroskoper varierer imidlertid i pris fra titusenvis til hundretusener av dollar, mens et sammensatt mikroskop for øyeblikket kan kjøpes for så lite som $100.