Når du tester effekten av pH på enzymaktivitet, bør du variere pH. Du kan imidlertid gjøre dette på gode eller dårlige måter. Husk hvilke ekstra faktorer som kan forvirre effekten av varierende pH. Ellers kan de oppnådde resultatene ikke skyldes endring i pH, men noen annen faktor. Å vite hvordan du kan variere pH riktig og hvilke faktorer som forveksler pH i et eksperiment, vil hjelpe deg med å få gode resultater og forstå hvorfor resultatene dine kanskje ikke er akkurat det du forventet.
Endre bare en ting
Når du tester effekten av pH på enzymaktivitet, varierer du bare pH mens du holder andre faktorer konstant. Disse andre faktorene inkluderer enzymkonsentrasjon, substratkonsentrasjon og temperatur. Faktorene som forblir konstante kalles kontrollvariablene. Kontrollvariabler lar deg konkludere med at resultatene på enzymaktivitet oppnådd i eksperimentet ditt skyldes variasjonen av pH, den uavhengige variabelen. Å vite hvilke faktorer som ikke skal endres i et eksperiment er like viktig som å vite hvilken faktor som skal variere, ellers vil det være vanskelig å konkludere med om resultatene faktisk skyldes den ene tingen som var testet.
Velg en syre eller en base
PH i en løsning kan endres ved å oppløse forskjellige mengder av en syre eller en base i vann. En måte å teste effekten av pH på enzymaktivitet er å gradvis tilsette dråper av en sterk syre eller en sterk base inn i løsningen som inneholder enzymet, og observer deretter punktet der enzymaktiviteten reduseres eller stopper. En syre er definert som en forbindelse som donerer et hydrogenion, kalt proton (H +), og en base er definert som en forbindelse som donerer et hydroksidion (-OH). Ulike syrer og baser har forskjellige antall protoner eller hydroksidioner å gi bort. Ikke alle protoner eller hydroksidioner blir umiddelbart donert når en syre eller base tilsettes til en løsning, men antall donerte protoner eller hydroksidioner endrer pH i forskjellige hastigheter. Derfor er det en god ide å variere pH i et enzymeksperiment ved å bruke bare en type syre eller en type base. Ellers legges andre variabler utilsiktet til.
Vev endrer også pH
Noen laboratorieeksperimenter som studerer enzymaktivitet innebærer å male opp ferskt vev for å frigjøre enzymene fra cellene og deretter legge til substrat for å måle enzymaktivitet. Fersk vev inneholder blod. På grunn av tilstedeværelsen av enzymer i blod som endrer karbondioksidgassen som er oppløst i blodet til karbonsyre, kan selve vevet påvirke pH. I eksperimenter som involverer enzymaktivitet i ferskt vev, er det nyttig å vaske av blodet i et beger med kaldt vann før du maler vevet. Dette vil minimere den utilsiktede endringen av pH på grunn av vevet, slik at den målrettede endringen i pH kan studeres.
Hold størrelsene likt
Som diskutert ovenfor er enzymkonsentrasjon en kontrollfaktor som ikke bør varieres når man tester effekten av pH på enzymaktivitet. Imidlertid varierer eksperimentelle prosedyrer i seg selv enzymkonsentrasjonen på subtile måter. Hvis man bruker en ren løsning av enzymer, holder man enzymkonsentrasjonen konstant. Imidlertid, i eksperimenter der enzymet er fra ferskt vev, som biter av potet, biter av planter eller biter av lever, endrer størrelsen på biter mengden enzym i hvert reagensrør. Dermed vil det være nyttig å kutte vevstykkene så jevnt som mulig. Dette er et annet eksempel på hvordan det å vite hva man ikke skal endre, og hvorfor det er vanskelig å ikke unngå endring helt, hjelper til med å tolke resultatene av å variere en faktor som pH.