Enterobacter aerogenes og andre arter av Enterobacteriaceae er enkle å identifisere ved hjelp av API-20E testsettet. Dette settet, produsert av bioMeriuex Inc., inneholder 20 minirør eller brønner for testen. Testen består i å inokulere en ren bakteriesuspensjon i testbrønnene og lese av farreaksjonene som oppstår. Identifikasjon er avhengig av å konvertere resultatene av disse fargereaksjonene til en syv-sifret kode kjent som Analytical Profile Index. Å matche denne koden med produsentens database gir en identifikasjon av organismen.
Åpne en ampulle som inneholder 5 ml natriumklorid 0,85 prosent medium. Fjern en enkelt koloni fra en 18 til 24 timer gammel isolasjonsplate med en pipette, og legg den i ampullen. Bland for å oppnå en homogen suspensjon. Bruk denne fjæringen så snart du er ferdig med å forberede den.
Sett opp en inkubasjonsboks som består av bikakede brønner i et brett utstyrt med et lokk. Åpne esken og tilsett 5 ml demineralisert eller destillert vann i brettbrønnene. Pakk stripen som følger med API 20E-testsett, og legg den i inkubasjonsboksen.
Fyll røret og koppen av brønnene merket "GEL", "VP" og "CIT" med suspensjonen du har forberedt. I de gjenværende brønnene fyller du bakteriesuspensjonen i røret, men ikke i kappen. Tilsett mineralolje i brønnene merket "ADH," "ODC," "LDC," "URE" og "H2S" for å skape et anaerobt miljø.
Dekk inkubasjonsboksen med lokket, og ruge ved en temperatur mellom 34 og 38 grader Celsius i 18 til 24 timer.
Observer brønnene, og legg merke til reaksjonene på resultatarket. Forutsatt at minst tre tester er positive, fortsett til farreaksjonene ved hjelp av kjemiske testløsninger eller reagenser som fulgte med settet. Tilsett en dråpe TDA-reagens i brønnen "TDA" og en dråpe hver av VP1- og VP2-reagensene i godt merket "VP." Hvis færre enn tre tester ble positive, ruker du stripene i ytterligere 24 timer før du legger til disse reagenser.
Observer fargeforandringene som produseres i brønnene. En rødbrun farge i TDA indikerer en positiv reaksjon. Vent i 10 minutter etter at du har tilsatt reagenser fra settet i VP1 og VP2. Betrakt en rød eller rosa farge som positiv og en blekrosa farge som vises etter 10 minutter som negativ.
Utfør oksidasetesten som spesifisert av produsenten av settet, og registrer resultatene sammen med resultatene fra de forrige 20 testene.
Mat dette syvsifrede profilnummeret i kitprodusentens database via en berøringsfarlig telefon. Vent med å motta identifikasjonen fra databasen. Hvis profilnummeret ikke gir spesifikke resultater, må du utføre de supplerende testene som er spesifisert av produsenten av settet.
