Hoewel ze niet met het blote oog te zien zijn, zijn bacteriën overal. Ze komen voor in voedsel, bodem, water, oppervlakken in onze huizen en in en op ons lichaam. Bacteriën komen over het algemeen voor in gemengde populaties. Door een specifieke bacterie te isoleren van andere bacteriesoorten in een bepaald monster, kunnen microbiologen de structuur en functie ervan bestuderen, kenmerken die bij de identificatie worden gebruikt. Microbiologen isoleren bacteriën vaak met behulp van een van de verschillende streak-plaattechnieken.
Hulpmiddelen
Een entlus wordt gebruikt om micro-organismen over te brengen. Het bestaat uit een nichroom- of platinadraad met een kleine, cirkelvormige lus aan het ene uiteinde. Het andere uiteinde is recht en schuift in een handvat. Er zijn ook plastic wegwerp-entingslussen beschikbaar. Bacteriën kunnen alleen worden geïsoleerd als ze groeien. Microbiologen kweken bacteriën voor het isoleren van streak-platen in ondiepe, ronde petrischalen gevuld met een vast medium, agar genaamd. Agar bootst de omgeving na waarin de bacteriën van nature groeien. De met media gevulde schalen zijn steriel en hebben een deksel om de groei van ongewenste organismen te voorkomen. Tijdens de strookplaatisolatie wordt de entlus herhaaldelijk gesteriliseerd in de vlam van een bunsenbrander.
Beginsel
De streak plate-techniek is de meest populaire methode om specifieke bacteriën te isoleren uit een monster dat een mengsel van micro-organismen bevat. De techniek verdunt in wezen het aantal organismen en vermindert hun dichtheid. Het stelt microbiologen in staat om individuele bacteriekolonies te onderscheiden en te isoleren. Een kolonie is een zichtbare cluster van bacteriën. Alle bacteriën in een enkele kolonie zijn afkomstig van dezelfde bacteriële cel. Bijgevolg zijn individuele kolonies "pure" kolonies. De zuivere kolonie wordt overgebracht naar een andere plaat om een zuivere cultuur te produceren die uit één type bacterie bestaat.
Procedure
Als het goed wordt gedaan, verdunt strookplaatisolatie een monster en stelt het individuele bacteriecellen in staat zich te ontwikkelen tot geïsoleerde kolonies. Een microbioloog begint met het steriliseren van de entlus in een vlam. Ze koelt de lus door deze tegen de agar aan te houden, doopt de lus vervolgens in het monster en spreidt het heen en weer om een deel van de plaat te bedekken. Ze steriliseert de lus, koelt deze af en ent een tweede, aangrenzend deel van de plaat door te slepen. de lus meerdere keren door het eerste gedeelte en het tweede gedeelte bedekken met een zigzag beweging. Dit pikt een klein aantal bacteriën uit de eerste sectie op en brengt ze over naar de tweede sectie. Het aantal keren dat deze basisprocedure wordt herhaald, hangt af van de gebruikte streak plate-methode. Ondanks de methode wordt het originele monster alleen gebruikt om het eerste deel van de plaat te inoculeren.
Streepplaatmethode:
Streakplaatmethoden variëren afhankelijk van het aantal agarsecties dat gestreept is. De T-streak methode maakt gebruik van drie secties: de bovenste helft en twee even grote onderste secties. Het initiële inoculum wordt in de bovenste helft van de plaat geplaatst. Bacteriën worden van het bovenste gedeelte naar een van de onderste gedeelten gesleept en vervolgens van dat onderste gedeelte naar het andere. Bij de kwadrantmethode worden vier even grote secties gestreept. Bij de continue uitstrijkmethode wordt meestal de bovenste helft van de plaat geënt, 180 graden gedraaid, en de andere helft van de plaat inoculeren zonder de lus te steriliseren of bacteriën van de vorige te slepen sectie.