Agar is een geleiachtige substantie die wordt gewonnen uit de gezuiverde celwanden van rode algen. Het wordt toegevoegd aan microbiologische media, dit zijn materialen waarop micro-organismen in laboratoria worden gekweekt, om de stof een stevigere structuur te geven. Agar heeft geen voedingswaarde, dus wanneer wetenschappers het gebruiken om micro-organismen te kweken, voegen ze verschillende voedingsstoffen toe om de bacteriegroei in petrischalen of reageerbuizen te verhogen. Wanneer onderzoekers bacteriën in een reageerbuis opslaan, wordt dit een agar-helling genoemd omdat de vloeibare groeimedia stolt terwijl de buis in een gekantelde positie staat. Een schroefdop op de helling voorkomt dat de agar uitdroogt.
Het medium is anders bereid voor slants dan petrischalen. Sterilisatie gebeurt met de agar in de buisjes; petrischalen worden vooraf gesteriliseerd voordat gesteriliseerde agar erin wordt gegoten. Meet de benodigde hoeveelheid water af en doe dit in een erlenmeyer. Verwarm het op een fornuis tot het bijna kookt. Voeg indien nodig andere ingrediënten toe en roer het mengsel langzaam en constant totdat ze oplossen. Deze ingrediënten kunnen rundvleesextract, pepton en pH-buffers bevatten, afhankelijk van het type micro-organisme dat wordt gekweekt.
Voordat u het gedehydrateerde agarpoeder toevoegt, moet u het mengen met een kleine hoeveelheid koud gedestilleerd water om klonteren te voorkomen. Wees voorzichtig bij het toevoegen van agar aan de hete vloeistof, omdat deze kan schuimen en de pot kan overlopen. Voeg kleine hoeveelheden agar per keer toe en roer om de agar gelijkmatig te verdelen. Zet het vuur uit wanneer het mengsel begint te stomen, voordat het kookt.
Plaats de niet-afgedopte reageerbuisjes op een reageerbuisrek. Vul de reageerbuizen door ongeveer 5 milliliter - ongeveer 0,17 ounce of 1 theelepel - van de gesmolten agar uit de pot over te brengen met een steriele pipet. Sluit elk van de reageerbuisjes losjes af, omdat de agar niet wordt gesteriliseerd als ze goed worden afgesloten. Steriliseer alle buizen in een autoclaaf gedurende ongeveer 25 minuten bij 121 graden Celsius of 250 graden Fahrenheit.
Als de agar nog heet is, kantelt u het rek met de reageerbuisjes voorzichtig op een stevige ondergrond of een dik boek, zorg ervoor dat het medium in de buizen zich in een schuine positie bevindt ten opzichte van de test buizen. Laat het medium afkoelen en stollen onder deze hoek, waardoor het oppervlak van de agar toeneemt. Draai de doppen van de reageerbuisjes vast nadat de agar is afgekoeld. De slants zijn klaar voor gebruik zodra de agar is gestold. Ze kunnen worden bewaard bij kamertemperatuur of in de koelkast voor toekomstig gebruik.
Inoculeer de helling door cellen met een entlus over te brengen van een micro-organisme met één kolonie op een plaat naar het oppervlak van de helling. Verplaats de lus over het oppervlak van de helling en sluit de buizen opnieuw af. Incubeer de helling totdat er tekenen van groei zijn en plaats de buis vervolgens in een koelkast.
