Wetenschappers en onderzoekers bestuderen de groei van bacteriën door culturen voor te bereiden in een laboratorium. Petrischalen met voedingsagar groeien bacterieculturen uit een enkele veegbeweging of inenting. Studenten kunnen thuis voedingsagar bereiden met benodigdheden van supermarkten of natuurvoedingswinkels voor een wetenschappelijk beursproject. Conventionele keukenapparatuur en standaard keukengerei bieden de tools om een steriel kweekmedium te bereiden dat in petrischalen kan worden afgegeven. Door steriele technieken te volgen door de materialen te verwarmen en de oppervlakken schoon en droog te houden, worden de resultaten verbeterd door te voorkomen dat schimmels en deeltjes de kweek besmetten.
Plaats een koffiefilter in een zeef en hang de zeef over de opening van de doorzichtige kom.
Giet de bouillon langzaam in het filter en zorg ervoor dat de bouillon niet langs de zijkanten van het filter overloopt. Als het filter verstopt raakt met deeltjes, verwijder dan het gebruikte filter, vervang het door een schoon filter en ga door met het gieten van de bouillon.
Verwijder de zeef en het filter van de bovenkant van de kom en kijk of de bouillon helder lijkt (d.w.z. er zijn geen zwevende deeltjes in de vloeistof). Als er deeltjes in de vloeistof drijven, herhaal dan stap 1 en 2 met een tweede doorzichtige kom en een filter voor verse koffie.
Zet de pan op het vuur en giet de heldere bouillon in de pan.
Voeg 16 ons gedestilleerd water toe aan de pot met de bouillon.
Zet het fornuis aan en stel het vuur in op middelhoog. Verwarm de bouillon aan de kook (d.w.z. er verschijnen kleine belletjes aan de zijkant van de pot).
Voeg 1 theelepel van het agar-agarpoeder toe aan de sudderende bouillon (ongeveer 2,5 gram) en roer het mengsel totdat het poeder is opgelost. Zorg ervoor dat je het poeder roert om op te lossen en te voorkomen dat de gelatine naar de bodem van de pot zakt (waar het kan verbranden).
Herhaal stap 7 totdat al het agar-agarpoeder in de bouillon is opgelost.
Blijf de bouillon ongeveer 1 minuut roeren om ervoor te zorgen dat al het poeder volledig is opgelost.
Zet het vuur uit, plaats het deksel op de pan en laat de vloeistof minimaal 15 minuten afkoelen.
Schik de steriele petrischalen op een rij voor eenvoudige montage, maar verwijder de deksels niet. Plaats indien gewenst een onderzetter om de warme pot vast te houden. Als u custardcups met deksel gebruikt in plaats van petrischalen, steriliseer dan de custardcups door de cups en deksels omgekeerd (ondersteboven) op een met folie beklede bakplaat en minimaal een uur in de oven bakken op 375 graden Fahrenheit. Zorg ervoor dat de gesteriliseerde kopjes en deksels voor gebruik volledig zijn afgekoeld.
Raak de buitenkant van de pot voorzichtig aan om te controleren of deze warm aanvoelt en plaats de pot op de onderzetter. Als de pot te heet is om aan te raken, wacht dan minstens 10 minuten om de pot te laten afkoelen.
Verwijder het deksel en zet opzij. Plaats de pollepel in de pot.
Verwijder het deksel van een petrischaal en giet voedingsbouillon om de schaal voor de helft te vullen. Bedek het gerecht onmiddellijk met het deksel.
Herhaal stap 14 voor elk van de petrischalen.
Laat de voedingsbouillon minimaal 1 uur ongestoord in de petrischaaltjes stollen.
Schud de petrischalen voorzichtig heen en weer om te controleren of de voedingsbouillon volledig is gestold. Als de bouillon niet volledig gegeleerd is, wacht dan nog 20 minuten voordat u opnieuw controleert.
Bedek een tafel of een plat oppervlak met een rol keukenpapier om een steriele werkruimte te creëren. Scheur een vel keukenpapier af en vouw het vier keer om een dikke, rechthoekige prop te maken. Plaats deze prop aan het ene uiteinde van het werkgebied.
Breng een petrischaal over naar het steriele werkgebied en verwijder het deksel. Draai de schaal voorzichtig om en plaats het ene uiteinde aan de zijkant van de opgevouwen prop, zodat deze omgekeerd en enigszins schuin ligt (met een kleine opening bij de papieren handdoekprop).
Draai het deksel om en plaats het boven de petrischaal op het steriele werkoppervlak. Als er waterdruppels op het deksel verschijnen, schudt u dit vocht er voorzichtig af voordat u het op het afgedekte oppervlak plaatst, maar raak de binnenkant van het deksel niet aan.
Herhaal stap 19 en 20 voor elke petrischaal, plaats een kant van de omgekeerde schaal aan de kant van de vorige schaal in plaats van de papieren handdoek. De schalen verschijnen als een verspringende set, met openingen aan één kant zodat overtollig vocht kan verdampen.
Kijk naar de omgekeerde petrischalen om te controleren of het vocht aan de zijkanten van de platen is verdampt. Zodra al het vocht is verdwenen, draait u de platen met de goede kant naar boven en dekt u ze onmiddellijk af met de deksels voor gebruik.
Inoculeer de voedingsagar op de plaat door een wattenstaafje met de gewenste cultuur op het voedingsagar-oppervlak af te vegen voordat u het afdekt met het deksel. Draai de petrischaal om zodat de vaste stof bovenop ligt. Bewaar de geënte petrischaal met de vaste stof bovenop om te kweken en het deksel op de bodem om vocht, losse deeltjes of groei op te vangen.
Dingen die je nodig hebt
- Koffiefilters
- zeef
- 2 grote, doorzichtige kommen
- 16 oz. vetvrije runderbouillon
- 16 oz. gedistilleerd water
- Kookpot met deksel
- Fornuis
- 10 gram agar agar
- Meet lepel
- Roerder
- Rol keukenpapier
- Pannenlappen
- Metalen pollepel
- Steriele petrischalen of doorzichtige custardbekers met deksel
- Optioneel: timer, onderzetter, oven, pan, aluminiumfolie, pan
Tips
Als er overmatig vocht op de deksels verschijnt, droog en steriliseer de deksels dan in de oven ingesteld op 375 graden Fahrenheit gedurende minimaal 1 uur (zorg ervoor dat u de deksels in een schone pan met aluminiumfolie plaatst voordat u ze in de oven).
Waarschuwingen
-
Wees voorzichtig bij het hanteren van de hete pot om brandwonden te voorkomen. Als de zijkant van de pot te heet is, is de vloeistof in de pot erg heet. De voedingsbouillon moet warm zijn om in de schalen te doseren, maar niet te heet om overmatige condensatie in de petrischaaltjes te veroorzaken tijdens het afkoelen en uitharden.
Raak de binnenkant van de petrischaal (d.w.z. plaat of deksel) niet aan om te voorkomen dat ongewenste bacteriën in de cultuur komen.
