Izolācijas paņēmieni svītru plāksnei

Lai gan tos nevar redzēt ar neapbruņotu aci, baktērijas ir visur. Tie pastāv pārtikā, augsnē, ūdenī, virsmās mūsu mājās, ķermenī un uz tā. Baktērijas parasti pastāv jauktās populācijās. Konkrētas baktērijas izolēšana no citām baktēriju sugām dotajā paraugā ļauj mikrobiologiem izpētīt tās struktūru un funkcijas, īpašības, kas izmantotas tās identificēšanai. Mikrobiologi bieži izolē baktērijas, izmantojot vienu no vairākām svītru plākšņu metodēm.

Inokulējošā cilpa tiek izmantota mikroorganismu pārnešanai. Tas sastāv no nihroma vai platīna stieples ar mazu apļveida cilpu vienā galā. Otrs gals ir taisns un ieslīd rokturī. Pieejamas arī plastmasas vienreizējās inokulācijas cilpas. Baktērijas var izolēt tikai tad, ja tās aug. Mikrobiologi audzē baktērijas svītru plāksnes izolēšanai seklos, apaļajos Petri trauciņos, kas piepildīti ar cietu barotni, ko sauc par agaru. Agars atdarina vidi, kurā baktērijas aug dabiski. Trauki, kas pildīti ar barotni, ir sterili un ar vāku, lai novērstu nevēlamu organismu augšanu. Izolācijas sloksnes laikā inokulējošā cilpa tiek atkārtoti sterilizēta Bunsen degļa liesmā.

Svītru plāksnes tehnika ir vispopulārākā metode, kā izolēt specifiskas baktērijas no parauga, kas satur mikroorganismu maisījumu. Tehnika būtībā atšķaida organismu skaitu un samazina to blīvumu. Tas ļauj mikrobiologiem atšķirt un izolēt atsevišķas baktēriju kolonijas. Kolonija ir redzama baktēriju kopa. Visas baktērijas vienā kolonijā nāk no vienas un tās pašas baktēriju šūnas. Līdz ar to atsevišķas kolonijas ir “tīras” kolonijas. Tīrā kolonija tiek pārvietota uz citu plāksni, lai iegūtu tīru kultūru, kas sastāv no viena veida baktērijām.

Pareizi izdarot svītru plāksnes izolāciju, paraugs tiek atšķaidīts un ļauj atsevišķām baktēriju šūnām attīstīties izolētās kolonijās. Mikrobiologs vispirms sterilizē inokulējošo cilpu liesmā. Viņa atdzesē cilpu, pieskaroties tai pie agara, pēc tam iemērc cilpu paraugā un izklāj to uz priekšu un atpakaļ, lai pārklātu šķīvja daļu. Viņa sterilizē cilpu, to atdzesē un, velkot, inokulē otru blakus esošo plāksnes daļu cilpa caur pirmo sadaļu vairākas reizes un pārklāj otro sadaļu, izmantojot zigzagu kustība. Tas no pirmās sekcijas uzņem nelielu skaitu baktēriju un pārnes tās uz otro sadaļu. Šīs pamatprocedūras atkārtošanas reižu skaits ir atkarīgs no izmantotās svītru plāksnes metodes. Neskatoties uz metodi, sākotnējo paraugu izmanto, lai inokulētu tikai plāksnes pirmo daļu.

Svītru plākšņu metodes atšķiras pēc svītraināto agara sekciju skaita. T-svītru metodē tiek izmantotas trīs sekcijas: augšējā puse un divas vienāda lieluma apakšējās sekcijas. Sākotnējo sējmateriālu ievieto plāksnes augšējā pusē. Baktērijas tiek vilktas no augšējās daļas uz vienu no apakšējām sekcijām, pēc tam no šīs apakšējās daļas uz otru. Kvadranta metodē tiek svītrotas četras vienāda lieluma sekcijas. Nepārtrauktās svītrošanas metode parasti ietver plāksnes augšējās puses inokulēšanu, pagriežot to par 180 grādiem un inokulējot otru plāksnes pusi, nesterilizējot cilpu un nevilcinot baktērijas no iepriekšējās sadaļā.