Buferšķīdumi pretojas pH izmaiņām, jo tie satur vājus skābes bāzes konjugātus, kas neitralizē H + un OH- jonus. Buferšķīdumi sastāv no vājām skābēm vai bāzēm un šīs skābes vai bāzes sāls. Piemērotas bufera sistēmas izvēle ir atkarīga no buferizācijas pH diapazona. Lielākā daļa bioloģisko reakciju notiek pie pH diapazona no 6 līdz 8. Fosfāta buferšķīdumi pH diapazonā no 6,5 līdz 7,5. Karboksilskābes buferi ir noderīgi no pH 3 līdz 6. Borāta buferi darbojas no pH 8,5 līdz 10. Aminoskābju buferi, piemēram, glicīns un histidīns, darbojas dažādos pH diapazonos. Tris buferis ir viena no visbiežāk izmantotajām bufera sistēmām bioloģijas laboratorijās. Tris buferšķīduma aprēķini tiks izmantoti šajā piemērā, bet metodika attiecas uz jebkuru buferšķīdumu.
Izmantojiet galīgā šķīduma molaritātes un tilpuma reizinājumu, lai noteiktu nepieciešamās bāzes molu. Piemēram, ja ir nepieciešami 2 litri 0,1 M Tris buferšķīduma, nepieciešamais Tris molu skaits ir:
Aprēķiniet nepieciešamo bufera masu, reizinot nepieciešamo molu skaitu ar bāzes molekulmasu. Piemēram, Tris bāzes 0,2 molu masa ir vienāda ar:
Bāzi izšķīdina destilētā ūdenī, izmantojot magnētisko maisīšanas stieni un maisot sildvirsmu. Izšķīdiniet to ūdens tilpumā tikai nedaudz mazāk par galīgo šķīduma tilpumu (no 950 līdz 975 ml uz katru litru gala šķīduma). Tris bufera pH mainās līdz ar koncentrāciju, un, ja tiek izmantots pārāk mazs sākotnējais tilpums, tas ir jāpielāgo atkārtoti. Vislabāk ir arī buferi sagatavot tajā pašā temperatūrā, kāda tā tiks izmantota testa vai eksperimenta laikā, jo Tris satur lielas no temperatūras atkarīgas izmaiņas.
Padomi
- Lai ietaupītu laiku, gatavojot buferšķīdumu, varat izmantot iepriekš sagatavotus bufera koncentrātus pie nepieciešamā pH un atšķaidīt vēlamajam molaritātei un tilpumam. Sagatavojiet buferšķīdumu tajā pašā temperatūrā, kādā to izmantos, lai izvairītos no būtiskām pH izmaiņām. Izvairieties no laikietilpīgas pH pielāgošanas, titrējiet tikai pēc atšķaidīšanas līdz vēlamajai koncentrācijai. Izšķīdinot pārāk mazā tilpumā, tiks veiktas atkārtotas titrēšanas.
Brīdinājumi
- Esiet piesardzīgs, rīkojoties ar skābēm un bāzēm. Valkājiet aizsargbrilles.
par autoru
Karla Bouliana ir evolucionāri biologa pēc apmācības un ārštata rakstniece ar aizraušanos. Papildus rakstīšanai Demand Studios un eHow, viņa ir rakstniece par apdāvināta bērna audzināšanu vietnē Suite101.com. Viņa aizrauj jaunu tēmu izpēti, veicot plašu pētījumu.
Foto kredīti
Foto pieklājīgi no Emmi P. @ morgueFile.com