Penki žingsniai paruošiant agaro šlaitus

Agaras yra drebučių pavidalo medžiaga, gaunama iš išgrynintų raudonųjų dumblių ląstelių sienelių. Jis dedamas į mikrobiologines terpes, kurios yra medžiagos, ant kurių laboratorijose auginami mikroorganizmai, kad medžiaga būtų labiau tvirta. Agaras neturi maistinės vertės, todėl kai mokslininkai jį naudoja mikroorganizmams auginti, jie prideda įvairių maistinių medžiagų, kad padidintų bakterijų dauginimąsi Petri lėkštelėse ar mėgintuvėliuose. Kai tyrėjai bakterijas laiko mėgintuvėlyje, tai vadinama agaro pakrypimu, nes skysčio auginimo terpė sukietėja, kol mėgintuvėlis yra pasviręs. Ant nuožulnios dangtelio užsukamas dangtelis neleidžia agarui išdžiūti.

Terpė ruošiama nuožulniai nei Petri patiekalai. Sterilizuojama mėgintuvėliuose esančiu agaru; Petri lėkštelės iš anksto sterilizuojamos, kol į jas pilamas sterilizuotas agaras. Išmatuokite reikiamą vandens kiekį ir įpilkite į Erlenmeyerio kolbą. Kaitinkite ant viryklės, kol ji beveik užvirs. Jei reikia, įpilkite kitų ingredientų ir lėtai ir nuolat maišykite mišinį, kol jie ištirps. Šie ingredientai gali būti jautienos ekstraktas, peptonas ir pH buferiai, atsižvelgiant į auginamų mikroorganizmų tipą.

instagram story viewer

Prieš dedant dehidratuotus agaro miltelius, sumaišykite juos su nedideliu kiekiu šalto distiliuoto vandens, kad nesusidarytumėte. Į karštą skystį įpilkite agaro atsargiai, nes jis gali putoti ir perpildyti puodą. Įpilkite nedidelius agaro kiekius ir maišykite, kad agaras pasiskirstytų tolygiai. Išjunkite ugnį, kai mišinys pradeda garuoti, kol jis užvirs.

Neuždengtus mėgintuvėlius uždėkite ant mėgintuvėlių stovo. Į mėgintuvėlius pripilkite sterilios pipetės iš puodo perpildami apie 5 mililitrus - maždaug 0,17 uncijos arba 1 arbatinį šaukštelį - išlydyto agaro. Kiekvieną mėgintuvėlį laisvai uždarykite, nes sandariai uždarius, agaras nebus sterilizuojamas. Sterilizuokite visus mėgintuvėlius autoklave maždaug 25 minutes 121 laipsnių Celsijaus arba 250 laipsnių pagal Celsijų temperatūroje.

Kai agaras vis dar karštas, atsargiai pakreipkite stelažą, laikantį mėgintuvėlius ant tvirto paviršiaus arba a stora knyga, užtikrinant, kad mėgintuvėlių viduje esanti terpė būtų pasvirusi, palyginti su bandymu vamzdeliai. Leiskite terpei atvėsti ir sustingti tokiu kampu, kuris padidina agaro paviršiaus plotą. Atvėsus agarą, priveržkite mėgintuvėlių dangtelius. Kai agaras sustings, šlaitai yra paruošti naudoti. Ateityje juos galima laikyti kambario temperatūroje arba šaldytuve.

Inokuliuokite nuožulnumą, pernešdami ląsteles su inokuliuojančia kilpa iš vienos kolonijos mikroorganizmo plokštelėje į nuožulnaus paviršiaus. Perkelkite kilpą per nuožulnaus paviršiaus paviršių ir vėl uždėkite vamzdelius. Inkubuokite nuolydį tol, kol bus augimo požymių, tada įdėkite mėgintuvėlį į šaldytuvą.

Teachs.ru
  • Dalintis
instagram viewer