Western blot testas, dar vadinamas imunoblotingu, yra specifinio baltymo baltymų mišinyje tyrimas. Western blot testas atliekamas po gelio elektroforezės arba su fermentais susieto imunosorbento tyrimo (ELISA) testo ir jame naudojami antikūnai specifiniams baltymams nustatyti.
Elektroforezė natrio dodecilsulfato poliakrilamido geliu geliu (SDS-PAGE) yra įprastas bandymas, naudojamas baltymams atskirti, kad jie būtų naudojami Western blote. Baltymai yra atskiriami pagal svorį ir elektrines savybes, jiems judant per gelio matricą.
ELISA teste bandymo paviršiui sukurti naudojami fermentai arba antikūnai, pritvirtinti prie kieto paviršiaus. Tada bandinys pridedamas prie bandymo paviršiaus. Antikūnai arba fermentai, reaguojantys ar prisijungiantys prie baltymų, rodo teigiamą rezultatą.
Western blot testas atliekamas po gelio elektroforezės. Atskirti baltymai perkeliami (arba sutepami) ant nitroceliuliozės arba nailono membranų ir identifikuojami pagal specifinius antikūnus, kuriuos žymi antrinis baltymas.
Western blot testas naudojamas teigiamiems gelio elektroforezės arba ELISA testų rezultatams patvirtinti. Western blot testas gali tiksliau identifikuoti baltymus ir atmesti klaidingus teigiamus rezultatus.