Yra daug metodų atskirti ir identifikuoti skirtingus junginius. Chromatografija yra mokslas, leidžiantis atskirti mišinio komponentus. The Rf (kartais neoficialiai parašyta kaip „rf vertė“) yra to dalis.
Yra daug skirtingų chromatografijos rūšių. Čia dėmesys sutelkiamas į paprasčiausią chromatografijos rūšį: popieriaus chromatografiją arba plonasluoksnę chromatografiją (TLC). Abiem taikoma ta pati bendra procedūra, kuri aprašyta toliau.
Ką apima chromatografija?
Visų tipų chromatografija turi a stacionari fazė ir a mobilioji fazė. Stacionari fazė, kaip jūs galite atspėti iš pavadinimo, nejuda. Popieriaus chromatografijoje stacionari fazė yra pats popierius.
Norint pradėti atskirti junginius, analizuojama medžiaga taškuojama ant apatinio popieriaus gabalo krašto. Tada popierius dedamas į stiklinę, kurioje yra judanti fazė, kuri yra tirpiklis. Tirpiklis turi būti vietoje, kurioje yra taškuota analizuojamos medžiagos. Jis neturėtų panardinti analitės.
Skystis kapiliariniu būdu juda popieriumi aukštyn. Jei analitę ar jos dalį pritraukia judrioji fazė, ji juda kartu su ja. Jei jis labiau traukia stacionarią fazę, jis nejudės.
Kai tirpiklis tam tikru mastu pajudėjo stacionarioje fazėje, turite chromatogramą. Ši chromatograma jums ką nors pasakoja apie skirtingų komponentų atskyrimą mišinyje arba apie tai, kokią medžiagą turite. Kaip?
Komponentų atskyrimas ir identifikavimas naudojant chromatogramą
Jei chromatogramos sudarymo sąlygos yra vienodos, atstumas, kurį juda konkreti medžiaga, turėtų pasikeisti. Šis atstumas matuojamas sulaikymo faktoriaus formulė arba Rf.
Laikymo koeficiento formulė yra:
Kai chromatograma sukuriama tokiu pačiu būdu, ši vertė turėtų būti vienoda.
Tai naudinga, kai turite medžiagų mišinį.
Pavyzdžiui, tarkime, kad turite keturis pavyzdžius: trys yra standartai, o vienas - mišinys. Jūsų užduotis yra nustatyti, kurie komponentai yra mišinyje.
Kokie yra standartai? Standartai yra grynas medžiagos mėginys. Tai galima atlikti chromatogramoje kaip palyginimą.
Mišinį galima paleisti, po kurio galite nustatyti, kiek skirtingų komponentų jame veikia.
Tarkime, standartas Nr. 1 turi didelį afinitetą vandeniui (judamajai fazei). Tai reiškia, kad jis judės popieriumi kartu su mobiliąja faze. Kita vertus, standartas Nr. 2 turi didelį afinitetą popieriui. Tai reiškia, kad jis liks stacionarioje fazėje. Galiausiai, standartas Nr. 3 yra susijęs su vandeniu ir popieriumi. Jūs prognozuojate, kad bus perkelta tarpinė suma.
Matote, kad tirpiklis juda 5,7 cm, o standartas Nr. 1 - 0,5 cm, standartas Nr. 2 - 4,8 cm, o standartas Nr. 3 - 2,9 cm. Kas yra Rf kiekvieno standarto vertės?
Dabar jūs žinote Rf standartų vertės. Tada ant kito popieriaus lapo uždėkite taškelį mišinio ir leiskite chromatogramai vystytis įdėdami ją į vandenį.
Pašalinę pastebėsite, kad yra du taškai, kurie atsiskyrė nuo pradinio įdėto taško. Tai greičiausiai reiškia, kad jūsų mišinyje yra tik du komponentai. Toliau reikia išsiaiškinti, kurį iš standartų atitinka šie du komponentai. Norėdami tai padaryti, jūs išmatuojate Rf vertybes.
Tirpiklis pajudėjo 4,5 cm. Vienas komponentas (vadinamas 1 komponentu) pasislinko 2,2 cm, o kitas - 3,9 cm (vadinamas 2 komponentu). Norėdami sužinoti, kurį standartą šie komponentai atitinka, turėsite naudoti R išlaikymo koeficiento formulęf vertybes.
Atsižvelgiant į šiuos Rf reikšmes, tikėtina, kad 1 komponentas atitinka 3 standartą, nes Rf vertės yra labai panašios. 2 komponentas greičiausiai yra standartas Nr. 2.