Kaip ir laikantis skanių patiekalų ruošimo receptų, norint sėkmingai atlikti eksperimentus, reikia atkreipti dėmesį į chemikalų maišymą tinkamais būdais. Norint pakartoti eksperimentą ir gauti tuos pačius rezultatus, svarbu padaryti tam tikro procento, pvz., 1%, sprendimus.
Kas yra BSA?
Žodis galvijus reiškia „karvė“, o galvijų serumo albuminas (BSA) yra baltymas, gaunamas iš karvių. Visų pirma, BSA yra baltymų rūšis, vadinama albuminu, kurio karvių kraujyje randama dideliais kiekiais. Kraujas yra raudonųjų kraujo kūnelių mišinys, todėl kraujas atrodo raudonas ir daugybė skirtingų baltymų rūšių, ištirpusių vandenyje. Jei kraujo ląstelės būtų pašalintos, jums liktų skaidrus skystis, vadinamas serumu. Taigi BSA yra albumino baltymas, randamas karvių kraujyje. Kraujyje albumino užduotis yra nešti kitus baltymus iš vienos vietos į kitą.
Kas yra 1% tirpalas?
Žodis „tirpalas“ apibūdina tai, kas egzistuoja kaip skystis. Pavyzdžiui, tiek vanduo, tiek pienas yra tirpalai. Kai sakome, kad vandens tirpalas yra 1% cukraus, tai reiškia, kad 1% tame tirpale esančių molekulių yra cukraus molekulės, o kiti 99% yra vandens molekulės. Taigi 1% BSA tirpalas reiškia, kad 1% tame tirpale esančių molekulių yra BSA. Kadangi BSA dažnai parduodamas kaip sausas miltelis, tam tikrą jo kiekį reikia pasverti ir ištirpinti skystyje, pavyzdžiui, vandenyje. BSA miltelių ištirpinimas skystyje vadinamas praskiedimu pagal svorį, t. Y. Chemikalų ar mokslinių eksperimentų instrukcijose dažnai užrašoma „w / v“.
Tiksliai pasverkite nedidelius miltelių kiekius
BSA milteliai yra labai lengvi ir dažnai naudojami nedideliais kiekiais, todėl tyrėjams reikia labai jautrios svėrimo skalės, kad būtų galima tiksliai išmatuoti BSA. Tyrėjams dažnai nereikia didelių kiekių BSA tirpalo, todėl pagaminus kelis galonus ar litrus vienu metu, būtų švaistomi milteliai ir laikymo vieta. Biochemijos ir molekulinės biologijos eksperimentuose dažnai naudojamas nedidelis kiekis BSA tirpalo, ir paprastai yra gera praktika kiekvieną kartą jį paruošti. Paprastas būdas pagaminti 1% BSA tirpalą yra pasverti vieną gramą BSA miltelių, supilti juos į graduotą cilindrą. į kurį telpa daugiau kaip 100 mililitrų (ml) vandens, tada įpilkite vandens, kol skysčio lygis pasieks 100 ml ženklas. Matematiškai vienas padalytas iš 100 yra lygus 1%.
Tinkamo tirpiklio parinkimas BSA milteliams ištirpinti
Ne visi eksperimentai reikalauja, kad BSA būtų ištirpinta vandenyje, nes grynas vanduo turi kitokių savybių nei skystis, tekantis gyvūnų kraujyje ir supantis ląstelių išorę. Gyvūnų viduje esantis skystis turi tam tikrą kiekį druskų ir rūgščių, taigi, jei BSA tirpalas yra skirtas nešdami vaistą, kuris bus švirkščiamas į gyvus gyvūnus, BSA miltelius reikia ištirpinti specialiuose skystas. Dažnas skystis, naudojamas eksperimentiniams tikslams, yra fosfato buferinis druskos tirpalas (PBS). PBS pasižymi panašiomis skysčių, esančių gyvų organizmų, tokių kaip pelės, šunys ir žmonės, savybėmis, todėl jis gali būti naudojamas ištirpinti BSA ir bet kokią cheminę medžiagą.
