겔 전기 영동은 실험실에서 분리하는 데 사용되는 방법입니다. DNA (데 옥시 리보 핵산). 또한 RNA와 단백질을 분리하는 데 사용할 수 있습니다.
겔 전기 영동 결과를 읽으면 연구자들이 샘플에서 가닥의 크기를 결정할 수 있습니다. 프로세스가 어떻게 작동하는지 이해하려면 먼저 겔 전기 영동 정의를 배워야합니다.
겔 전기 영동 정의
겔 전기 영동은 분자 생물학 DNA, RNA 및 단백질의 크기와 전하를 결정합니다. 더 큰 DNA 가닥에서 효소에 의해 소화 된 DNA 조각을 사용하여 시작합니다.
결과로 겔 전기 영동 밴드 강도를 사용하여 조각의 크기를 파악할 수 있습니다. 그런 다음 하나를 얻을 수 있습니다 DNA 지문.
단어의 "electro"부분에서 알 수 있듯이 젤 전기 영동 정의 전기장의 사용을 수반합니다. 전극을 덮는 완충액, 젤이 내부에 매달려있는 우물 및 전극 자체를 포함하는 특수 기계가 사용됩니다.
겔 전기 영동의 겔
겔 전기 영동 일반적으로 아가 로스라고하는 해조류에서 추출한 한천의 정제 된 버전으로 만든 슬래브로 형성된 겔을 사용해야합니다.
아가 로즈 젤 다양한 크기의 전하 분자가 다른 속도로 이동할 수있는 다공성 매트릭스를 만듭니다. 에 티듐 브로마이드 (EtBr)라고하는 화학 물질을 금형에 붓기 전에 겔 용액에 첨가합니다.
분리 할 매우 작은 DNA 또는 단백질 분자가있는 경우 폴리 아크릴 아미드 겔 아가 로즈 대신. 폴리 아크릴 아미드를 사용할 때는 신경 독성이 있으므로주의하십시오.
특수 빗을 아가 로즈 젤 몰드에 넣고 굳은 후 조심스럽게 제거합니다. 이것은 DNA 조각 또는 다른 분자 샘플이 배치되는 곳으로, 먼저 특수 로딩 염료와 혼합되었습니다. 그만큼 로딩 염료 다른 방법으로는 보이지 않기 때문에 DNA의 움직임을 추적하는 것입니다.
라는 것을 포함하는 우물도 있습니다 DNA 사다리 또는 마커. 이것은 연구중인 DNA 샘플과의 크기 비교를 위해 알려진 밴드 크기의 고품질 템플릿 역할을합니다. 전기장이 적용되면이 음으로 하전 된 분자는 겔을 통해 양의 끝으로 이동합니다.
겔 전기 영동 결과
분자가 겔의 끝까지 이동하면 읽을 시간입니다. 겔 전기 영동 결과. 겔의 EtBr 염료는 DNA에 쉽게 결합하여 사용되며 UV 광선 아래에서 DNA 띠가 형광을 발하는 것을 볼 수 있습니다.
에 티듐 브로마이드를 만지지 않도록 각별한주의를 기울여야합니다. DNA에 대한 친화 성은 또한 그것을 풀 수 있다는 것을 의미하기 때문입니다. 따라서 돌연변이 유발 원으로 간주됩니다. 가격이 더 높지만 더 새롭고 안전한 염료를 사용할 수 있습니다.
UV 광선은 DNA 또는 기타 분자 샘플의 겔 전기 영동 밴드 강도를 나타냅니다. 젤에서 밴드의 위치는 DNA 단편. 그만큼 겔 전기 영동 밴드 강도 분자의 농도를 나타냅니다.
이제 샘플의 DNA 밴드를 DNA 래더 샘플과 비교할 수 있습니다. 사다리의 알려진 밴드 크기는 연구중인 DNA의 상대적 크기를 결정하는 데 도움이됩니다.
고품질 겔 전기 영동의 중요성
겔 전기 영동은 DNA 지문 및 법의학. 연구자들이 많은 종의 게놈에 대한 정보를 결정하는 데 도움이되었습니다. 고품질 겔 전기 영동 결과를 사용하는 것은 이러한 중요한 분야에 필수적입니다.
따라서 고품질 성분으로 작업하고 젤을 만드는 데 세심한주의를 기울이는 것이 중요합니다. DNA 샘플이 RNA 또는 단백질로 오염되는 것을 방지하는 것이 중요합니다.
깨끗한 완충액을 사용하고 젤을 조심스럽게 부어서 빗살이 고르게 형성되도록하고 모든 시약을 적절한 온도로 유지하십시오. 겔 전기 영동 밴드 강도는 생생하고 깨끗해야하며 배경에 다른 DNA 흔적이없고 RNA 또는 단백질 얼룩이 젤을 오염시키지 않아야합니다.