완충액은 H + 및 OH- 이온을 중화시키는 약산-염기 접합체를 포함하기 때문에 pH 변화에 저항합니다. 완충액은 약산 또는 염기와 그 산 또는 염기의 염으로 구성됩니다. 적절한 버퍼 시스템의 선택은 버퍼링을위한 pH 범위에 따라 다릅니다. 대부분의 생물학적 반응은 6 ~ 8의 pH 범위에서 발생합니다. 6.5 ~ 7.5의 pH 범위에서 인산염 버퍼 버퍼. 카르 복실 산 완충제는 pH 3에서 6까지 유용합니다. 붕산염 완충제는 pH 8.5에서 10까지 기능합니다. 글리신 및 히스티딘과 같은 아미노산 버퍼는 다양한 pH 범위에서 작동합니다. Tris 버퍼는 생물학 실험실에서 가장 일반적으로 사용되는 버퍼 시스템 중 하나입니다. Tris 버퍼 솔루션에 대한 계산은 다음 예에서 사용되지만 방법론은 모든 버퍼 솔루션에 적용됩니다.
최종 용액의 몰과 부피의 곱을 사용하여 필요한 염기의 몰을 결정합니다. 예를 들어, Tris 버퍼의 0.1M 용액 2 리터가 필요한 경우 필요한 Tris의 몰 수는 다음과 같습니다.
염기의 분자량에 필요한 몰 수를 곱하여 필요한 버퍼의 질량을 계산합니다. 예를 들어, 0.2 몰의 Tris 염기의 질량은 다음과 같습니다.
자석 교반 막대를 사용하여 증류수에베이스를 녹이고 핫 플레이트를 저어줍니다. 최종 용액 부피 (최종 용액 1 리터당 950 ~ 975 mL)보다 약간 적은 양의 물에 녹입니다. Tris 버퍼의 pH는 농도에 따라 변하며 초기 부피가 너무 작 으면 재조정이 필요합니다. Tris는 pH에 큰 온도 의존적 변화를 가지고 있기 때문에 분석 또는 실험 중에 사용될 동일한 온도에서 버퍼를 준비하는 것이 가장 좋습니다.
팁
- 버퍼 용액을 준비 할 때 시간을 절약하기 위해 필요한 pH에서 미리 만들어진 버퍼 농축액을 사용하고 원하는 몰 농도와 부피로 희석 할 수 있습니다. 상당한 pH 변화를 피하기 위해 사용되는 것과 동일한 온도에서 완충액을 준비합니다. 시간이 많이 걸리는 pH 조정을 피하고 원하는 농도로 희석 한 후에 만 적정하십시오. 너무 적은 부피로 용해하면 적정이 반복됩니다.
경고
- 산과 염기를 취급 할 때주의하십시오. 보호용 고글을 착용하십시오.
저자 정보
Carla Boulianne은 교육을받은 진화 생물 학자이며 열정적 인 프리랜서 작가입니다. Demand Studios 및 eHow에 글을 쓰는 것 외에도 그녀는 Suite101.com에서 영재 자녀 양육의 장편 작가입니다. 그녀는 광범위한 연구를 통해 새로운 주제를 탐구하는 데 흥분합니다.
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Emmi P. 사진 제공 @ morgueFile.com