효소는 정의 된 3 차원 구조를 가지고 있습니다. 이 구조의 변화는 효소의 활동을 변화시킵니다. 반응 혼합물의 pH는이 구조와 활성을 변경합니다. 모든 효소는 최대 활성을 나타내는 최적의 pH를 가지고 있습니다. 이 pH와의 현저한 차이는 효소의 3 차원 구조에 변화를 일으켜 활성을 감소시킵니다. Catechol oxidase 효소의 최적 pH는 약 7입니다.
Catechol Oxidase 정보
카테 콜은 산소가있는 상태에서 카테 콜 산화 효소에 의해 산화되어 벤조 퀴논을 형성하며, 공기에 노출되면 멜라닌을 형성합니다. 이 효소는 tyrosinase, diphenol oxidase 및 polyphenol oxidase와 같은 다른 이름으로도 알려져 있습니다. 감자, 사과 및 바나나에는 무색 카테 콜에 작용하여 갈색 멜라닌으로 전환하는 카테 콜 산화 효소가 포함되어 있습니다. 이러한 품목을 자르고 공기에 노출시킬 때 발생하는 갈변은이 반응의 결과입니다.
Catechol Oxidase 추출
카테 콜 산화 효소는 바나나 나 감자에서 추출 할 수 있습니다. 박격포와 유봉에 두 배의 물로 바나나를 으깬다. 또는 바나나를 물과 혼합하여 카테 콜 산화 효소 추출물을 얻습니다. 버터 모슬린을 여과하고 냉장고에 보관하십시오. 감자를 사용하는 경우 껍질을 벗기고 덩어리로 만든 다음 700ml의 차가운 증류수를 사용하여 고속으로 블렌딩합니다. 이 감자 주스를 무명천으로 걸러 내고 냉장 보관하십시오.
실험 세부 정보
pH 값이 2, 4, 6, 7 및 8 인 완충 용액을 준비합니다. 이 pH 값으로 5 개의 시험관에 라벨을 붙입니다. 각 튜브를 각 버퍼로 1/4 용량까지 채 웁니다. 각 튜브에 카테 콜 산화 효소 추출물 10 방울을 추가 한 다음 카테 콜 10 방울을 추가합니다. 튜브를 흔들고 각 튜브의 색상을 0에서 5까지의 눈금으로 기록하십시오. 여기서 0은 색상이 없음을 나타내고 5는 어두운 갈색을 나타냅니다. 튜브를 계속 흔들고 다음 20 분 동안 5 분마다 색상을 확인합니다.
결과 해석
20 분 동안 얻은 데이터를 사용하여 그래프를 그립니다. X 축에 버퍼의 pH를 표시합니다. Y 축에 0에서 5까지의 색상 강도를 나타냅니다. 모든 pH 값에 대해 색상 강도를 표시하고 이러한 표시를 결합하여 최종 그래프를 얻습니다. 이 플롯의 피크를 찾고 catechol oxidase 반응에 대한 최적 pH를 확인합니다. 실험을 올바르게 수행했다면 최적 pH 값은 7이됩니다. pH 7에서 효소는 가장 활동적이며 카테 콜의 산화를 빠르게 촉매하여 진한 갈색을냅니다.
지침
바나나와 감자에는 카테 콜이 들어 있습니다. 따라서이 중 일부가 반응 중에 산화되어 관찰되는 색상 강도에 기여할 가능성이 있습니다. 이 반응을 방지하려면 카테 콜 산화 효소 추출물을 각 튜브에 넣기 전에 얼음 블록에 보관하십시오. 카테 콜은 유독하므로 피부에 닿지 않도록하십시오. 카테 콜 용액을 피펫 팅하지 말고 유출 물이있는 경우 장갑을 끼고 종이 타월로 닦으십시오.