როგორ მზადდება ნიმუში მიკროსკოპის ქვეშ ნახვისთვის?

ადრე უხილავი სამეფო გამოვლინდა 1600-იანი წლების დასაწყისში პირველი რთული მიკროსკოპების მშენებლობით, რამაც გამოიწვია მნიშვნელოვანი ცვლილებები სამეცნიერო გაგებაში. ძირითადი რთული მიკროსკოპები ახლა სტანდარტული აღჭურვილობაა მედიცინასა და საბუნებისმეტყველო მეცნიერებებში. გადაცემული ხილული შუქი ანათებს წვრილი პრეპარატების გასადიდებლად. ელექტრონული მიკროსკოპები გადაცემა და სკანირება განვითარდა 1931 წლიდან. ისინი არ იყენებენ ოპტიკურ სინათლეს, არამედ ელექტრონების და მაგნიტური ველების სხივებს ნიმუშების სანახავად. ძირითადად ინსტიტუციური კვლევისთვის, ნიმუშის მომზადება მოითხოვს რთულ, ძვირადღირებულ აღჭურვილობას.

არსებობს რამდენიმე სპეციალიზებული ტიპის რთული მიკროსკოპი, მაგრამ ყველაზე გავრცელებულია ნათელი ველის მიკროსკოპები. მათთვის ნიმუშები უნდა იყოს მხოლოდ რამდენიმე მიკრონი, რაც მეტრის მემილიონეა, სისქეა. სქელი ნიმუშები არ უშვებს საკმარის შუქს და არ იძლევა ზუსტი ფოკუსირების საშუალებას. კაშკაშა ველის მიკროსკოპებს აქვთ მილის ობიექტური ლინზები, ნიმუშთან ყველაზე ახლოს, და ზედა ნაწილში თვალის ლინზები, ან სათვალე. სხვადასხვა გადიდების რამდენიმე ობიექტური ლინზა ტრიალებს ცხვირსახოცზე, ან კოშკურაზე. ცხვირის ცხრილის ქვემოთ მდებარე სცენა ინახავს ნიმუშის სლაიდს, ხოლო ქვემოთ სინათლის წყარო ანათებს კონდენსატორის მეშვეობით ნიმუშს. თანამედროვე კომპოზიციურ მიკროსკოპებს შეუძლიათ ობიექტის გადიდება მისი თავდაპირველი ზომების 1000-დან 2000-ჯერ.

მცირე ზომის ნივთებისთვის, როგორიცაა თმა, პატარა მწერები, მწერების ნაწილები ან მტვრის მტვრის მარცვლები, ნიმუში მოთავსებულია პირდაპირ ცენტრალურ ნაწილზე მინის ან პლასტმასის მიკროსკოპის სლაიდი მცირე რაოდენობით სამონტაჟო საშუალებით, ჩვეულებრივ სინთეზური ან ბუნებრივი ფისოვანი პროდუქტი მუდმივი სლაიდები. დროებითი სლაიდებისთვის, მაგალითად, აუზის წყლის წვეთი, რომელიც შეიცავს მიკროორგანიზმებს, წყალი არის სამონტაჟო საშუალება. დაიცავით ნიმუშები საფარის გადანაწილებით, მრგვალი ან კვადრატული ძალიან თხელი მინის ან პლასტმასის ნაჭრით. ზოგიერთ ნიმუშს სჭირდება ბუნებრივი ან სინთეზური საღებავების შეღებვა, რომლებიც მიკროსკოპისთვის კარგად ჩანს.

თხელი ნიმუშის მოსამზადებლად მარტივი გზაა ქსოვილის მცირე ზომის ნატეხი დაფარვის ქვეშ. ხშირად იყენებენ მცენარის ნიმუშებში ქრომოსომების, სწრაფად მზარდი ქსოვილების სანახავად, როგორიცაა ფესვების წვერები ან ანტერები უჯრედების დაყოფის დროს ინახება ფიქსატორში, შემდეგ არბილებენ და ლაქავენ გამოვლენას ქრომოსომები. ფანქრის საშოს ბოლოდან ნაზი წნევა, რომელიც კონცენტრირებულია გადასაფარებელზე გადაფურცლულ ნიმუშზე, უჯრედებს ერთ ფენად აშორებს. ნაცხებში, ნიმუში წვრილად ვრცელდება ერთ სლაიდზე სხვა სლაიდის გამოყენებით, როგორც გამავრცელებელი და მიღებული ნაცხის გამოშრობა და შეღებვა ხდება. მედიცინაში ცხიმდება სხეულის სითხის ნიმუშები, როგორიცაა სისხლი, ცერებრო-ზურგის სითხე ან სპერმა.

სექციის უფრო რთული პროცედურა ხდება მაშინ, როდესაც შესწავლა სჭირდება მთლიანი მცირე ორგანიზმის სტრუქტურასა და ორგანიზებას. ნიმუშების უმეტესობისთვის ჯერ ქსოვილი ინახება და გამაგრდება და წყალი იშლება. შემდეგ ნიმუში ჩასმულია მყარ გარემოში, როგორიცაა ცვილი ან პლასტმასა და დაჭრილი ძალიან წვრილ მონაკვეთებად მხოლოდ რამდენიმე მიკრონის სისქით, ზუსტი დანადგარის გამოყენებით, რომელსაც მიკროტომი ეწოდება. ნიმუში ორიენტირებულია დანაწევრებისას განივი ან გრძივი მონაკვეთების მისაცემად. მონაკვეთები მიმაგრებულია მიკროსკოპის სლაიდებზე, ამოღებულია ჩანერგვის საშუალება და ხდება ქსოვილების შეღებვა სტრუქტურებისა და უჯრედების დიფერენცირებისთვის. იქ, სადაც აუცილებელია სიჩქარე, მაგალითად, კიბოს ქირურგიულ ბიოფსიებში, ნიმუშები გაყინულია, გაყინვის მიკროტომით დაჭრილი, ნახატი და გამოკვლევა ხდება.