როგორ გამოვთვალოთ უჯრედის კონცენტრაცია

მეცნიერებსა და ტექნიკოსებს ხშირად სჭირდებათ სუსპენზიაში უჯრედების კონცენტრაციის გამოანგარიშება. მაგალითად, როდესაც პაციენტს სისხლი ექნება ექიმის კაბინეტში, ლაბორატორიას შეუძლია გამოიყენოს გარკვეული მეთოდები სისხლის მოცემული მოცულობის სისხლის თეთრი უჯრედების მოსაძებნად. ეს ექიმს უამრავ ინფორმაციას აძლევს ჯანმრთელობის შესახებ მისი პაციენტის შესახებ, განსაკუთრებით მისი იმუნური სისტემის შესახებ და არის თუ არა ის ებრძვის ინფექციას ან სხვა დაავადებას. მსგავსი ტესტები შეიძლება მოიძიონ მრავალი სხვა უჯრედი სისხლში, ასევე ზურგის სითხე და სხეულის სხვა სითხეები, მაგალითად, სპერმის უჯრედების რაოდენობა სპერმაში ნაყოფიერების მიზნით. მეცნიერები ასევე ითვლიან ბაქტერიების, საფუარებისა და სხვა მიკროორგანიზმების უჯრედების კონცენტრაციას მრავალი მიზნისთვის, დაწყებული ეკოლოგიური კვლევებით დამთავრებული სამრეწველო ტექნოლოგიებით. ერთ-ერთი ყველაზე გავრცელებული ტექნიკა ასევე ისწავლება კოლეჯის ბიოლოგიის მრავალ გაკვეთილზე და ის იყენებს მოწყობილობას, რომელსაც თვლის პალატა ეწოდება.

სანამ უჯრედის სუსპენზია მივა თვლემის პალატაში, მას შეიძლება დასჭირდეს განზავება, რადგან მასში შეიძლება ათასობით ან მილიონობით უჯრედი იყოს. ამ შემთხვევაში, უჯრედების გონივრული დათვლა შეუძლებელია. ნიმუშის განზავების მიზნით გამოიყენეთ სტერილური პიპეტი, რომ მოათავსოთ ათი მიკროლიტრი უჯრედის ხსნარი სინჯარაში, რომელიც შეიცავს 90 მიკროლიტრს განზავებით. გამხსნელის ტიპი დამოკიდებულია უჯრედის ტიპზე. კარგად აურიეთ. ეს ხსნარი ახლა ათჯერ უფრო გაზავებულია, ვიდრე საწყისი ნიმუში, ამიტომ მისი განზავების კოეფიციენტია 10

instagram story viewer
-1. იარლიყი. გაიმეორეთ ეს რამდენჯერმე, სტერილური პიპეტის გამოყენებით ყოველ ჯერზე, სანამ ხსნარი საკმარისად განზავდება. თუ იგი მეორედ განზავდით, მეორე სინჯარა 100-ჯერ უფრო გაზავდა, ვიდრე საწყისი ხსნარი, ამიტომ განზავების ფაქტორი იყო 10-2 და ასე შემდეგ.

შეიძლება დაგჭირდეთ რამდენიმე განზავების მოსინჯვა, რომ განისაზღვროს თვლის პალატის სწორი განზავების ფაქტორი. მთვლელი პალატა, ძირითადად, არის ძალიან პატარა, მკაფიო, მართკუთხა ყუთი, რომელსაც აქვს ზუსტი სიღრმე და ზემოდან დატანილი აქვს ზუსტი ბადე. იგი ასევე ცნობილია როგორც ჰემოციტომეტრი, ან ზოგჯერ ჰემაციტომეტრი. მიზანია, სუსპენზია იყოს საკმარისად განზავებული, რომ როდესაც მას ათვალიერებენ თვლემის კამერაში, უჯრედები არ გადაფარავს და ისინი ერთიან რეჟიმში ნაწილდება მთელ ქსელში. განლაგებული სუსპენზია პიპეტით მიაქციეთ თვლის პალატაში ჭაში, სადაც კაპილარული მოქმედების საშუალებით ის ბადის პალატაში მოთავსდება. განათავსეთ თვლის პალატა მიკროსკოპის ეტაპზე და დაათვალიერეთ იგი დაბალი სიმძლავრის ქვეშ.

ბადე შეიცავს კვადრატებს, რომლებიც გაკეთებულია კიდევ უფრო მცირე ზომის კვადრატებისგან. შეარჩიეთ დაახლოებით ოთხი ან ხუთი კვადრატი, ანდა მრავალი მათგანი უნდა დაითვალოთ მინიმუმ 100 უჯრედი, თქვენს მიერ არჩეული ნიმუშით, მაგალითად, ოთხი კუთხე და ცენტრალური კვადრატი. თუ უჯრედები დიდია, ეს შეიძლება იყოს დიდი კვადრატები, მაგრამ თუ უჯრედები პატარაა, თქვენ შეგიძლიათ აირჩიოთ პატარა კვადრატები.

თითოეული ქსელის კვადრატის სპეციფიკური მოცულობა შეიძლება განსხვავდებოდეს პალატის მწარმოებლის მიხედვით, მაგრამ ხშირად, პალატის სიღრმე არის 0,1 მილიმეტრი, დიდი კვადრატების ფართობი 1 კვადრატული მილიმეტრია, ხოლო მცირე კვადრატების ფართობი 0,04 კვადრატული მილიმეტრი უფრო დიდ კვადრატებს, მოცულობის 0,1 კუბური მილიმეტრი აქვს. ამ მაგალითისთვის, ჩათვალეთ, რომ თქვენ ჯამში დაითვალეთ 103 უჯრედი ხუთ კვადრატში და რომ თქვენ განზავდით საწყის ნიმუშს, სანამ განზავების ფაქტორი არ იქნებოდა 10-2.

თუ ქსელის თითოეულ კვადრატს აქვს 0,1 კუბური მილიმეტრის მოცულობა და ხუთი ითვლიდა, მაშინ პალატის მთლიანი მოცულობა, რომელიც დათვლილი იყო, იყო 0,5 კუბური მილიმეტრი, და იქ იყო 103 უჯრედი. გაორმაგდა და 1 კუბური მილიმეტრი გახდა 206 უჯრედი. ერთი კუბური სანტიმეტრი უდრის 1 მილილიტრს, რაც სასარგებლო საზომია სითხეებისთვის. კუბურ სანტიმეტრში არის 1000 კუბური მილიმეტრი. ამიტომ, კუბური სანტიმეტრი ან მილილიტრი სუსპენზია რომ ყოფილიყო, თქვენ 206000 (206 x 1000) უჯრედს ჩათვლიდით. ასე გამოიყურება, როგორც განტოლება:

ბადის კვადრატის მოცულობა count დათვლილი კვადრატების რაოდენობა = დათვლილი სუსპენზიის საერთო მოცულობა

უჯრედების რაოდენობა count დათვლილი სუსპენზიის მოცულობა = უჯრედების რაოდენობა მილიმეტრზე კუბურად

უჯრედების რაოდენობა მილიმეტრზე კუბურად 1000 × = უჯრედების რაოდენობა მილილიტრზე

თქვენ უნდა გაითვალისწინოთ ნებისმიერი განზავება, შესრულებული იმისათვის, რომ საწყისი ხსნარი იყოს მიკროსკოპში დასათვლელი. ამ მაგალითში განზავების კოეფიციენტია 10-2. გამოსათვლელი საწყისი კონცენტრაციის გამოსათვლელად:

უჯრედების რაოდენობა მილილიტრზე ÷ განზავების ფაქტორი = უჯრედის კონცენტრაცია

ამ მაგალითისთვის, უჯრედების რაოდენობა მილილიტრზე არის 206,000 და მისი დაყოფა 10-ზე-2 (0,01) იძლევა უჯრედის კონცენტრაციას 20,600,000 უჯრედის მილილიტრში საწყის ნიმუშში.

Teachs.ru
  • გაზიარება
instagram viewer