შეცდომის წყაროები გელის ელექტროფორეზში

ლარის ელექტროფორეზი არის ერთ – ერთი მთავარი მეთოდი, რომელიც გამოიყენება მოლეკულურ ბიოლოგიაში დნმ – ის ანალიზისთვის. ეს მეთოდი გულისხმობს დნმ – ის ფრაგმენტების მიგრაციას ლარის საშუალებით, სადაც ისინი გამოყოფილია ზომის ან ფორმის საფუძველზე. ამასთან, მეცნიერულად ჯანსაღი მეთოდი, მაგალითად, გელის ელექტროფორეზი, არ არის დაცული შეცდომებისგან.

•••Jezperklauzen / iStock / გეტის სურათები

ლარის ელექტროფორეზი მოიცავს გელის გამოყენებას, რომელიც ჩვეულებრივ მზადდება ისეთი პოლიმერებისგან, როგორიცაა აგაროზა. ლარი ჩაეფლო ბუფერულ ხსნარში, რომელიც ატარებს ელექტრულ ველს. საინტერესო დნმ-ის ნიმუში ჯერ ფრაგმენტდება შეზღუდვის ფერმენტების გამოყენებით და შემდეგ შეჰყავთ ლარში. ელექტრული ველის ჩართვისას, ლარის დნმ – ის ფრაგმენტები მიგრირდება პოზიტიური ელექტროდისკენ. თუ დნმ – ის ფრაგმენტები სხვადასხვა ზომისაა, მაშინ მიგრაციის დრო განსხვავებული იქნება თითოეული ზომის ფრაგმენტისთვის. შემდეგ ფრაგმენტები ვიზუალიზდება საღებავის ან ავტორადიოგრაფიის გამოყენებით და ჩანს ლარებში.

•••aiaikawa / iStock / გეტის სურათები

ელექტროფორეზის ძირითადი გამოყენება არის მოლეკულურ ბიოლოგიაში დნმ-ის ანალიზის საშუალება, მაგრამ იგი ასევე გამოიყენება კრიმინალისტიკაში, როგორც დანაშაულის ადგილის ნიმუშების იდენტიფიკაციის საშუალება. მნიშვნელოვანია, რომ ამ ტექნიკაში შეცდომების წყარო შემცირდეს, რათა ზუსტი შედეგები მივიღოთ. შეცდომის ერთ – ერთი წყაროა დნმ – ის ნიმუშის დაბინძურება. თუ ნიმუშში არის უცხო დნმ, გელს უფრო მეტი ზოლი ექნება, ვიდრე ნახავთ გელში, რომელიც შეიცავს მხოლოდ გასუფთავებულ ნიმუშს.

•••IndiaImages / iStock / გეტის სურათები

გელის კონცენტრაცია ასევე სწორი უნდა იყოს შეცდომების თავიდან ასაცილებლად. თუ კონცენტრაცია ძალიან მაღალია ან ძალიან დაბალია, ფრაგმენტები მიგრირდება ძალიან ნელა ან ძალიან სწრაფად. ეს გამოიწვევს შეცდომებს სხვადასხვა ზოლების გადაჭრისას. ელექტროფორეზის მიმდინარეობისას საჭიროა ზრუნვა, რომ ძაბვა მდგრადია. ძაბვის ნებისმიერი რყევა გამოიწვევს დნმ – ის ფრაგმენტების არამდგრად მიგრაციას, რის შედეგადაც ხდება შეცდომა ზოლების კითხვისას. ბუფერული ხსნარი ასევე უნდა იყოს სწორი შემადგენლობის, რადგან არასწორი pH ან იონური კონცენტრაციის მქონე ბუფერი შეცვლის დნმ – ის ფრაგმენტების ფორმას, ასევე იცვლება მათი მიგრაციის დრო.

•••ინგრამის გამომცემლობა / ინგრამის გამომცემლობა / გეტის სურათები

რაც მთავარია, გელი სწორად უნდა იყოს ვიზუალიზებული. თუ ნიმუშების ვიზუალიზაციისთვის გამოყენებული საღებავის ან რადიოაქტიური ზონდის კონცენტრაცია ძალიან მაღალია, მიღებული სურათი ძალიან არეული იქნება, რადგან ნარჩენი ფრაგმენტების ვიზუალიზაციაც მოხდება. თუ ლარის კონცენტრაცია ძალიან დაბალია, ვიზუალიზაცია არ მოხდება. როდესაც ყველა ეტაპზე დაიცავით სწორი პროცესები, გელის ელექტროფორეზი მიიღებს შედეგებს, რომლებიც ზუსტია და მათი გამოყენება დიდი ნდობით შეიძლება. როგორც ყველა სამეცნიერო პროცედურის შემთხვევაში, გელი ელექტროფორეზი შეიძლება იყოს მიდრეკილი შეცდომებისკენ, მაგრამ მათი შემცირება შესაძლებელია სათანადო მომზადებისა და დამუშავების შემთხვევაში.