როგორ გამოვთვალოთ Kcat

ჩამოაყალიბეთ პროდუქტის კონცენტრაციის დიაგრამა დროისა და ფერმენტული ანალიზის პირველი სინჯარის მონაცემებისათვის. შენიშვნა: ჰორიზონტალური ღერძი უნდა იყოს "დრო", ხოლო ვერტიკალური ღერძი უნდა იყოს "პროდუქტის კონცენტრაცია".

გამოთვალეთ წრფივი უკუგანვითარების ხაზი მონაცემთა წერტილებისთვის, რომლებიც თქვენ მოაწყვეთ ნაწილში 1, ნაბიჯი 1. მიუხედავად იმისა, რომ Excel და გრაფიკული კალკულატორები მარტივად განსაზღვრავენ ამ სწორხაზოვან მოდელს, შეგიძლიათ გააკეთოთ რეგრესიის შეფასება ხაზის დახრა მეზობელ მონაცემთა წერტილებს შორის პროდუქტის კონცენტრაციის სხვაობის დაყოფით მათი დროის სხვაობაზე.

წრფივი რეგრესიის ხაზის დახრის აღრიცხვა 1-ლი ნაწილიდან, ნაბიჯი 2-დან, როგორც "საწყისი რეაქციის სიჩქარე (Vo)". შენიშვნა: რეგრესიის ხაზის მოდელში "[პროდუქტის კონცენტრაცია] = მ [დრო] + ბ," კოეფიციენტი "მ" არის ფერდობზე

გაიმეორეთ 1, 2 და 3 ნაბიჯები ტესტის დანარჩენი სინჯარისთვის.

დაანგარიშეთ სუბსტრატის კონცენტრაციის ინვერსია თითოეული სინჯარისთვის მისი საწყისი რეაქციის სიჩქარის საწინააღმდეგოდ (ნაწილი 1-დან, ნაბიჯი 4). მაგალითად, თუ საცდელი მილის საწყისი სიჩქარეა 50 მიკრომოლარის საწყისი სუბსტრატის კონცენტრაციით (uM) იყო 80 uM / წმ, ინვერსიები იქნებოდა 1/50 uM სუბსტრატის კონცენტრაციისთვის და 1/80 uM / s საწყისი საწყისი სიჩქარე შენიშვნა: სუბსტრატის შებრუნებული კონცენტრაცია უნდა იყოს ჰორიზონტალურ ღერძზე, ხოლო საპირისპირო საწყისი სიჩქარე ვერტიკალურ ღერძზე.

შენიშვნა: სუბსტრატის კონცენტრაცია უნდა იყოს ჰორიზონტალურ ღერძზე, ხოლო საწყისი რეაქციის სიჩქარე უნდა იყოს ვერტიკალურ ღერძზე.

განსაზღვრეთ წრფივი რეგრესიის ხაზი იმ დიაგრამისთვის, რომელიც თქვენ შეადგინეთ მე –2 ნაწილში, ნაბიჯი 1. შენიშვნა: რადგან თქვენ უნდა იცოდეთ y გადაკვეთა რეგრესიის ხაზისთვის, უნდა შეიყვანოთ წერტილები აქედან განყოფილება 2, ნაბიჯი 1 ან Excel- ში ან გრაფიკული გამოსახულების კალკულატორში და გამოიყენეთ ჩამონტაჟებული რეგრესიის მოდელირება ფუნქციონალური

1-ზე გაყოფა y- გადაკვეთაზე ხაზოვანი რეგრესიის ხაზისგან. ეს მოგცემთ Vmax- ის ინვერსიის მნიშვნელობას, ფერმენტის რეაქციის მაქსიმალურ სიჩქარეს. შენიშვნა: თუ წრფივი უკუსვლის მოდელი მიიღებს ფორმას "[Inverse Vo] = m [Inverse Substrate Conc.] + B", მაშინ "b" - ს მნიშვნელობა იქნება y- გადაკვეთა. 1 გაყოფაზე "b" გაანგარიშება Vmax– ის ინვერსიული გამოთვლა.

Vmax– ის რეალური მნიშვნელობის გამოსათვლელად 1-ზე დაყოფა შედეგზე, ნაწილი 2, ნაბიჯი 3.

განსაზღვრეთ ფერმენტის კონცენტრაცია თავდაპირველ ანალიზში (იხილეთ ნედლი მონაცემები). შენიშვნა: ფერმენტის კონცენტრაცია ერთნაირია ყველა სინჯარაში; მხოლოდ სუბსტრატის კონცენტრაციები იცვლება ანალიზში.

დაყავით Vmax (ნაწილი 2, ნაბიჯი 4) ფერმენტის კონცენტრაციით (ნაწილი 2, ნაბიჯი 5). შედეგი არის Kcat- ის მნიშვნელობა.

ენდო პასკესი, ჩიკაგოში დამფუძნებლის ავტორს, აქვს გამოცდილების წერა საავტომობილო კომპანიებისთვის (BMW, MINI Cooper, Harley-Davidson), ფინანსური მომსახურებისთვის (აივი ფონდები, უილიამ ბლერი, ტ. Rowe Price, CME Group), ჯანმრთელობის დაცვის (Abbott) და სამომხმარებლო საქონლის (Sony, Motorola, Knoll) კლიენტები. მას აქვს ჰარვარდის უნივერსიტეტის ინგლისურენოვანი ხელოვნების ბაკალავრის ხარისხი, მაგრამ არ ზრუნავს ოქსფორდის მძიმაზე.

  • გაზიარება
instagram viewer