מה משתנה בבדיקת השפעת ה- pH על פעילות האנזים?

כאשר אתה בודק את השפעת ה- pH על פעילות האנזים, עליך לשנות את ה- pH. עם זאת, אתה יכול לעשות זאת בדרכים טובות או רעות. זכור אילו גורמים נוספים עשויים לבלבל את ההשפעות של pH משתנה. אחרת, התוצאות שהתקבלו אולי לא נובעות משינוי ה- pH, אלא מגורם אחר. הידיעה כיצד לשנות נכון את ה- pH ואילו גורמים מבלבלים את ה- pH של הניסוי יעזור לך להשיג תוצאות טובות ולהבין מדוע התוצאות שלך אינן יכולות להיות בדיוק מה שציפית.

כאשר בודקים את השפעת ה- pH על פעילות האנזים, יש לשנות רק את ה- pH תוך שמירה קבועה על גורמים אחרים. גורמים אחרים אלה כוללים ריכוז אנזים, ריכוז מצע וטמפרטורה. הגורמים שנשארים קבועים נקראים משתני הבקרה. משתני בקרה מאפשרים לך להגיע למסקנה שהתוצאות על פעילות האנזים שהתקבלו בניסוי שלך נובעות משינוי ה- pH, המשתנה הבלתי תלוי. לדעת אילו גורמים אין לשנות בניסוי חשוב באותה מידה כמו לדעת מהו הגורם שישתנה, אחרת יהיה קשה להסיק האם התוצאות נובעות למעשה מהדבר היחיד שהיה בָּדוּק.

ניתן לשנות את ה- pH של תמיסה על ידי המסת כמויות שונות של חומצה או בסיס במים. אחת הדרכים לבדוק את השפעת ה- pH על פעילות האנזים היא להוסיף בהדרגה טיפות של חומצה חזקה או בסיס חזק לתמיסה המכילה את האנזים, ואז התבוננו בנקודה בה פעילות האנזים מאטה או עוצר. חומצה מוגדרת כתרכובת התורמת יון מימן, הנקראת פרוטון (H +), ובסיס מוגדר כתרכובת התורמת יון הידרוקסיד (-OH). לחומצות ובסיסים שונים יש מספר שונה של פרוטונים או יונים של הידרוקסיד. לא כל הפרוטונים או יוני ההידרוקסיד נתרמים מיד כאשר מוסיפים חומצה או בסיס לתמיסה, אך מספר הפרוטונים או יונים ההידרוקסידים שנתרמים משנה את ה- pH בקצב שונה. לפיכך, מומלץ לשנות את ה- pH בניסוי אנזים באמצעות סוג אחד בלבד של חומצה או סוג בסיס אחד. אחרת, משתנים אחרים מתווספים שלא בכוונה.

כמה ניסויים במעבדה החוקרים את פעילות האנזים כוללים שחיקה של רקמה טרייה כדי לשחרר את האנזימים מהתאים ואז הוספת מצע למדידת פעילות האנזים. רקמה טרייה מכילה דם. בשל הימצאותם של אנזימים בדם המשנים את גז הפחמן הדו חמצני המומס בדם לחומצה פחמנית, הרקמה עצמה עשויה להשפיע על ה- pH. לפיכך, בניסויים הכוללים פעילות אנזימים ברקמה טרייה, מועיל לשטוף את הדם בכוס מים קרים לפני טחינת הרקמה. זה ימזער את השינוי הבלתי-מכוון של ה- pH בגלל הרקמה, כך שניתן יהיה ללמוד את השינוי התכליתי ב- pH.

כפי שנדון לעיל, ריכוז האנזים הוא גורם בקרה שאין לשנותו בעת בדיקת השפעת ה- pH על פעילות האנזים. עם זאת, הליכים ניסיוניים עדיין משתנים מטבעם את ריכוז האנזים בדרכים עדינות. אם משתמשים בתמיסה טהורה של אנזימים, הרי ששומרים על ריכוז האנזים קבוע. עם זאת, בניסויים בהם האנזים הוא מרקמה טרייה, כמו נתחי תפוח אדמה, חתיכות צמחים או חתיכות כבד, גודל הנתחים משנה את כמות האנזים בכל מבחנה. לפיכך, יעזור לחתוך את פיסות הרקמה בצורה אחידה ככל האפשר. זו דוגמה נוספת לאופן שבו הידיעה מה לא לשנות, ומדוע קשה שלא להימנע משינוי לחלוטין, עוזרת לפרש את התוצאות של שינוי גורם כמו pH.