HPLC מציעה שיטה מהירה, אוטומטית ומדויקת ביותר לזיהוי רכיבים כימיים מסוימים במדגם, אך היא יכולה להיות יקרה, מורכבת ואינה עובדת על כל הדגימות. מעבדות רפואיות, פליליות, סביבתיות וייצור משתמשות בטכניקה בכימות וכדי להפריד בין הכימיקלים במדגם. ל- HPLC יתרונות וחסרונות גם בהשוואה לטכניקות אחרות.
HPLC וטכניקות דומות
כמו צורות אחרות של כרומטוגרפיה, HPLC מאפשר הפרדה של רכיבים כימיים באמצעות שלב נייד ושלב נייח. השלב הנייד הוא נוזלי והשלב הנייח הוא מוצק. מכיוון שהרכיבים השונים נעים במהירויות שונות הם נפרדים זה מזה. טכניקות חלופיות כוללות אלקטרופורזה נימית, כאשר חומרים נודדים דרך פתרונות בחשמל שדה ושיטות כרומטוגרפיות אחרות כגון מיצוי פאזה מוצקה, כרומטוגרפיית גז ושכבה דקה כרומטוגרפיה.
מהירות, יעילות ודיוק
בהשוואה לטכניקות כרומטוגרפיות אחרות, כגון TLC, HPLC מהיר ויעיל במיוחד. היא משתמשת במשאבה, ולא בכוח המשיכה, כדי לכפות ממס נוזלי דרך חומר סופח מוצק, כאשר רכיבים כימיים שונים נפרדים כשהם נעים במהירות שונה. ניתן להשלים את התהליך בערך 10 עד 30 דקות, והוא מספק רזולוציה גבוהה. זה מדויק ושחזור מאוד. מכיוון שהוא אוטומטי במידה רבה, ניתן לבצע ריצות HPLC בסיסיות עם הכשרה מינימלית.
עלות ומורכבות
למרות יתרונותיה, HPLC יכול להיות יקר, ודורש כמויות גדולות של אורגני יקר. טכניקות כגון מיצוי שלב מוצק ואלקטרופורזה נימית יכולות להיות זולות ומהירות אף יותר, במיוחד לניתוח תחת נוהלי ייצור טובים. למרות שקל יחסית להשתמש בשיטות HPLC קיימות, זה יכול להיות מורכב לפתור בעיות או לפתח שיטות חדשות. זה בעיקר בגלל מערך המודולים, העמודות והשלבים הניידים השונים.
רגישות ורזולוציה
באופן כללי, HPLC הוא תכליתי ומדויק ביותר בכל הנוגע לזיהוי וכימות רכיבים כימיים. עם שלבים רבים המעורבים, הדיוק של HPLC הוא בעיקר בגלל התהליך שהוא אוטומטי ולכן ניתן לשחזור מאוד. ל- HPLC יש רגישות נמוכה לתרכובות מסוימות, וחלקן לא ניתנות לזיהוי מכיוון שהן נספגות באופן בלתי הפיך. חומרים נדיפים מופרדים טוב יותר באמצעות כרומטוגרפיה של גז.