התווה תרשים של ריכוז המוצר לעומת הזמן עבור הנתונים מה מבחנה הראשונה של הניתוח האנזימטי. הערה: הציר האופקי צריך להיות "זמן", והציר האנכי צריך להיות "ריכוז המוצר".
חשב את קו הרגרסיה הליניארי עבור נקודות הנתונים שתכננת בסעיף 1, שלב 1. בעוד שמחשבוני Excel וגרפים יכולים לקבוע בקלות את המודל הליניארי הזה, ניתן להפיק אומדן של הרגרסיה שיפוע קו על ידי חלוקת ההבדל בריכוז המוצר בין נקודות נתונים סמוכות לפי הפרש הזמן שלהן.
רשום את שיפוע קו הרגרסיה הליניארי מסעיף 1, שלב 2 כ"מהירות תגובה ראשונית (Vo). " הערה: במודל קו הרגרסיה "[ריכוז המוצר] = m [זמן] + b," המקדם "m" הוא מִדרוֹן.
חזור על שלבים 1, 2 ו -3 עבור שאר המבחנות במבחן.
זממו את ההופכי של ריכוז המצע עבור כל מבחנה לעומת ההפוך של מהירות התגובה הראשונית שלו (מסעיף 1, שלב 4). לדוגמא, אם המהירות ההתחלתית למבחנה עם ריכוז מצע ראשוני של 50 מיקרומולרי (uM) היה 80 uM / s, ההפכים היו 1/50 uM עבור ריכוז המצע ו- 1/80 uM / s עבור הראשוני מְהִירוּת. הערה: ריכוז המצע ההפוך צריך להיות על הציר האופקי, ומהירות ההתחלה ההפוכה צריכה להיות על הציר האנכי.
הערה: ריכוז המצע צריך להיות על הציר האופקי, ומהירות התגובה הראשונית צריכה להיות על הציר האנכי.
קבע את קו הרגרסיה הליניארית עבור התרשים שתכננת בסעיף 2, שלב 1. הערה: מכיוון שתצטרכו לדעת את צומת ה- y עבור קו הרגרסיה, עליכם להזין את הנקודות מ סעיף 2, שלב 1 לתוך Excel או מחשבון גרפים והשתמש במודל הרגרסיה המובנה פונקציונליות.
חלקו 1 בצומת y מקו הרגרסיה הליניארית. זה ייתן לך את ערך ההופכי של Vmax, מהירות התגובה המרבית של האנזים. הערה: אם מודל הרגרסיה הליניארית מקבל את הצורה "[Vo הפוך] = m [תשתית הפוכה קונצרט] + b", אז הערך של "b" יהיה הצומת y. חלקו 1 ב "b" כדי לחשב את ההופכי של Vmax.
חלק את 1 בתוצאה מסעיף 2, שלב 3 לחישוב הערך בפועל של Vmax.
קבע את ריכוז האנזים בבדיקה המקורית (ראה נתונים גולמיים). הערה: ריכוז האנזים זהה לכל המבחנות; רק ריכוזי המצע משתנים במבחן.
חלק את ה- Vmax (מסעיף 2, שלב 4) לפי ריכוז האנזים (מסעיף 2, שלב 5). התוצאה היא הערך של Kcat.
קופירייטר משיקגו, אנדי פסקווי, בעל ניסיון רב בכתיבת כלי רכב (BMW, MINI Cooper, Harley-Davidson), שירותים פיננסיים (Ivy Funds, William Blair, T. לקוחות Rowe Price, CME Group), שירותי בריאות (אבוט) ומוצרי צריכה (Sony, Motorola, Knoll). הוא בעל תואר ראשון באמנויות באוניברסיטת הרווארד, אך לא אכפת לו מהפסיק באוקספורד.