Un regno precedentemente invisibile fu rivelato all'inizio del 1600 con la costruzione dei primi microscopi composti che portò a importanti revisioni nella comprensione scientifica. I microscopi composti di base sono ora apparecchiature standard in medicina e scienze naturali. La luce visibile trasmessa risplende attraverso le sottili preparazioni per l'ingrandimento. Microscopi elettronici a trasmissione e scansione sviluppati dal 1931 in poi. Non usano luce ottica, ma fasci di elettroni e campi magnetici per visualizzare i campioni. Principalmente per la ricerca istituzionale, la preparazione dei campioni richiede attrezzature complesse e costose.
Comprensione dei microscopi composti
Esistono diversi tipi specializzati di microscopi composti, ma i microscopi a campo chiaro sono i più comuni. I campioni per loro dovrebbero essere solo diversi micron, che è un milionesimo di metro, spesso. I campioni più spessi non lasciano passare abbastanza luce e non consentono una messa a fuoco precisa. I microscopi a campo chiaro hanno un tubo con lenti dell'obiettivo nella parte inferiore, più vicina al campione, e una lente oculare, o oculare, nella parte superiore. Diversi obiettivi di diversi ingrandimenti ruotano su un portaobiettivi o torretta. Il tavolino appena sotto il portaobiettivi tiene il vetrino del campione, e al di sotto di esso una fonte di luce brilla attraverso un condensatore sul campione. I moderni microscopi composti possono ingrandire un oggetto da 1.000 a 2.000 volte le sue dimensioni originali.
Montature intere
Per piccoli oggetti come peli, piccoli insetti, parti di insetti o granelli di polline, il campione viene posizionato direttamente sulla parte centrale di un vetrino per microscopio in vetro o plastica con una piccola quantità di mezzo di montaggio, solitamente un prodotto in resina sintetica o naturale per permanente diapositive. Per diapositive temporanee, come una goccia di acqua di stagno contenente microrganismi, l'acqua è il mezzo di montaggio. Proteggere i campioni con un vetrino coprioggetto, un pezzo di vetro o plastica molto sottile rotondo o quadrato. Alcuni campioni devono essere colorati con coloranti naturali o sintetici destinati a essere visti bene al microscopio.
Schiaccia e sbavature
Un modo semplice per preparare un campione sottile è schiacciare o appiattire un piccolo pezzo di tessuto sotto il vetrino coprioggetto. Spesso utilizzato nei campioni di piante per vedere i cromosomi, i tessuti in rapida crescita come le punte delle radici o le antere in fase di divisione cellulare sono conservati nel fissativo, quindi ammorbiditi e colorati per rivelare il cromosomi. Una leggera pressione dall'estremità della gomma di una matita centrata sul campione coperto costringe le cellule a separarsi in un unico strato. Negli strisci, il campione viene distribuito sottilmente su un vetrino utilizzando un altro vetrino come diffusore e lo striscio risultante viene essiccato e colorato. In medicina, vengono spalmati campioni di fluidi corporei, come sangue, liquido cerebrospinale o sperma.
Sezioni di tessuto macchiato
Una procedura di sezionamento più complicata si verifica quando è necessario studiare la struttura e l'organizzazione di un intero piccolo organismo o di un pezzo di tessuto. Per la maggior parte dei campioni, prima il tessuto viene preservato e indurito e l'acqua rimossa. Quindi il campione viene incorporato in un mezzo rigido come cera o plastica e tagliato in sezioni molto sottili dello spessore di pochi micron utilizzando una macchina di precisione chiamata microtomo. Il campione è orientato per fornire sezioni trasversali o sezioni longitudinali quando affettato. Le sezioni vengono fatte aderire su vetrini da microscopio, il mezzo di inclusione rimosso e i tessuti colorati per differenziare strutture e cellule. Laddove la velocità è essenziale, come nelle biopsie chirurgiche per il cancro, i campioni vengono congelati, affettati con un microtomo congelante, colorati ed esaminati.