L'agar è una sostanza gelatinosa derivata dalle pareti cellulari purificate delle alghe rosse. Viene aggiunto ai terreni microbiologici, che sono materiali su cui vengono coltivati i microrganismi nei laboratori, al fine di fornire una struttura più solida alla sostanza. L'agar non ha alcun valore nutritivo, quindi quando gli scienziati lo usano per coltivare i microrganismi, aggiungono vari nutrienti per aumentare la crescita batterica in piastre di Petri o provette. Quando i ricercatori conservano i batteri in una provetta, si parla di inclinazione dell'agar perché il mezzo di crescita liquido si solidifica mentre la provetta è in posizione inclinata. Un tappo a vite sull'inclinazione impedisce all'agar di seccarsi.
Il terreno è preparato in modo diverso per le inclinazioni rispetto alle piastre di Petri. La sterilizzazione avviene con l'agar nelle provette; le piastre di Petri vengono pre-sterilizzate prima di versarvi l'agar sterilizzato. Misurare la quantità di acqua necessaria e metterla in una beuta. Fatelo scaldare su un fornello fino quasi a bollore. Aggiungi altri ingredienti se necessario e mescola lentamente e costantemente fino a quando non si dissolvono. Questi ingredienti possono includere estratto di manzo, peptone e tamponi di pH, a seconda del tipo di microrganismo in coltura.
Prima di aggiungere la polvere di agar disidratata, mescolarla con una piccola quantità di acqua distillata fredda per evitare la formazione di grumi. Prestare attenzione quando si aggiunge l'agar al liquido caldo poiché può schiumare e traboccare dalla pentola. Aggiungere piccole quantità di agar alla volta e mescolare per distribuire uniformemente l'agar. Spegnere il fuoco quando il composto inizia a bollire, prima che arrivi a bollore.
Posizionare le provette senza tappo su un portaprovette. Riempire le provette trasferendo circa 5 millilitri - circa 0,17 once o 1 cucchiaino - dell'agar fuso dal vaso utilizzando una pipetta sterile. Tappare liberamente ciascuna delle provette, perché l'agar non sarà sterilizzato se sono sigillate ermeticamente. Sterilizzare tutte le provette in autoclave per circa 25 minuti a 121 gradi Celsius o 250 gradi Fahrenheit.
Quando l'agar è ancora caldo, inclinare con cautela il rack tenendo le provette su una superficie solida o a libro spesso, assicurandosi che il mezzo all'interno dei tubi sia in una posizione inclinata rispetto al test tubi. Lasciare che il terreno si raffreddi e si solidifichi a questo angolo, che aumenta la superficie dell'agar. Serrare i tappi delle provette dopo che l'agar si è raffreddato. Gli slant sono pronti per l'uso una volta che l'agar si è solidificato. Possono essere conservati a temperatura ambiente o in frigorifero per un uso futuro.
Inoculare l'inclinazione trasferendo le cellule con un'ansa inoculante da un microrganismo a colonia singola su una piastra alla superficie dell'inclinazione. Spostare l'anello sulla superficie dell'inclinazione e richiudere i tubi. Incubare l'inclinazione fino a quando non ci sono segni di crescita, quindi mettere la provetta in frigorifero.
