Un microbiologo usa la colorazione con chitina in modo da poter vedere chiaramente i funghi al microscopio. I funghi usano la chitina come materiale strutturale nelle loro pareti cellulari in modo che la macchia mostri bene la parete cellulare. La macchia blu cotone lattofenolo è la macchia più comune per i funghi. Il fenolo uccide i microrganismi e impedisce agli enzimi fungini di abbattere la cellula. Il colorante blu cotone trasforma la chitina in blu. La colorazione della chitina è una procedura relativamente semplice con materiali poco costosi. Puoi creare la tua tintura o acquistare una macchia preparata commercialmente.
Preparare una soluzione di lattofenolo cotone blu. Pesare 0,05 grammi di colorante blu per cotone utilizzando una bilancia sensibile. Mescolare il colorante con 20 millilitri di acqua distillata in una provetta e lasciarlo per una notte.
Indossare i guanti prima di terminare la preparazione della macchia il giorno successivo. Mettere 20 ml di acido lattico in un becher e mescolarlo con 20 g di cristalli di fenolo. Mescolare fino a quando il composto non si sarà sciolto. Aggiungere 40 ml di glicerolo e mescolare. Quindi filtrare la soluzione di cotone blu attraverso un pezzo di carta da filtro nel becher e mescolare accuratamente.
In alternativa, utilizzare una fonte di macchia preparata in commercio. Conserva la macchia a temperatura ambiente.
Etichettare un vetrino da microscopio con il nome o il numero di identificazione del campione. Utilizzare un contagocce sterile per mettere una singola goccia di un campione d'acqua al centro del vetrino da microscopio. Per un campione secco, posizionare una singola goccia di soluzione alcolica al 70% sul vetrino, quindi utilizzare un'ansa sterile per mescolare il campione secco nell'alcol.
Utilizzare un contagocce pulito per trasferire due gocce della macchia blu cotone lattofenolo al centro del vetrino. Se stai usando il 70% di alcol sul vetrino, fallo prima che l'alcol evapori dal vetrino.
Toccare un bordo del vetrino coprioggetto del microscopio su un bordo della preparazione del campione umido. Lascia che il vetrino cada delicatamente sulla preparazione del campione, assicurandoti di non intrappolare bolle d'aria sotto il vetrino. Il campione colorato è ora pronto per essere esaminato al microscopio.