L'agar nutriente è un tipo di terreno complesso di uso generale utilizzato principalmente per la coltivazione di una varietà di microrganismi.
Supporti complessi microbiologia parlando, sono mezzi di crescita composti da una gamma di nutrienti disponibili e molecole proteiche in concentrazioni sconosciute. L'agar nutriente viene utilizzato per la coltura di microbi non esigenti come batteri e lieviti.
Cosa cresce sull'agar nutriente?
I microrganismi hanno bisogno di cibo, acqua e un ambiente adatto per sopravvivere e crescere. Agar nutriente fornisce queste risorse per molti tipi di microbi, da fungo come lieviti e muffe a batteri comuni come Streptococco e Stafilococco.
I microbi che possono essere coltivati su terreni complessi come l'agar nutriente possono essere descritti come organismi non esigenti. Gli organismi non esigenti sono microbi in grado di crescere e prosperare senza particolari condizioni nutrizionali o ambientali.
Alcuni batteri non possono essere coltivati con terreno agar nutritivo.
Organismi esigenti (batteri schizzinosi) potrebbero aver bisogno di una fonte di cibo molto specifica non fornita nell'agar nutriente. Un esempio di un organismo esigente è Treponema pallido, batteri che causano la sifilide. Gli scienziati hanno cercato senza successo di far crescere questo batterio in una coltura per oltre 100 anni.L'agar nutriente può essere utilizzato per la coltura di microrganismi per diversi scopi. Un uso è la coltivazione e il mantenimento di colonie specifiche di organismi non esigenti per lo studio o l'identificazione scientifica. Un altro uso è quello di rilevare e quantificare la presenza di sostanze potenzialmente dannose batteri o altri microbi nell'acqua, nelle acque reflue, nei crostacei, nella carne, nei latticini e in altri prodotti alimentari.
Il terreno deve essere mantenuto sterile per garantire che gli unici microbi in crescita siano quelli destinati alla coltura e non crescano a causa della contaminazione del terreno.
Ingredienti dell'agar nutriente
Il principale ingredienti in agar nutriente sono peptone, estratto di manzo e agar. Questi ingredienti vengono polverizzati e quindi aggiunti all'acqua distillata. La composizione specifica del nutriente agar può variare leggermente a seconda del produttore e della fonte degli ingredienti utilizzati.
La composizione del mezzo di agar nutriente preparato è 0,5 percento di peptone, 0,3 percento di estratto di manzo (o estratto di lievito), 1,5 percento di agar e 0,5 percento di cloruro di sodio.
Per definire agar
Per definire l'agar, pensa a un carboidrato complesso proveniente da alghe rosse marine che agisce come agente solidificante nel mezzo nutritivo. Non ha alcun valore nutritivo per i microbi da coltivare.
L'agar gela a una temperatura di 113 gradi Fahrenheit (45 gradi Celsius) e si scioglie a 203 gradi Fahrenheit (95 gradi Celsius). L'agar comprende anche varietà alimentari che possono essere utilizzate come ingrediente addensante per zuppe, gelatine e altri alimenti.
Definizione di peptone
Il definizione di peptone è una proteina solubile formata nelle prime fasi della disgregazione proteica durante il processo di digestione. È prodotto dalla digestione parziale di materiali proteici come carne, gelatina e caseina utilizzando acidi o enzimi.
Lo scopo del peptone nell'agar nutritivo è fornire la fonte primaria di azoto organico per la coltura microbica in crescita e può anche essere una fonte di carboidrati e vitamine. L'esatta composizione del peptone nel mezzo nutritivo varierà a seconda della fonte proteica e del metodo di digestione.
Estratto di manzo
Il estratto di manzo utilizzato per realizzare il terreno di agar nutritivo è una miscela di particelle solubili in acqua di tessuto animale, carboidrati, composti organici dell'azoto, vitamine e sale.
L'estratto di lievito può essere utilizzato anche per produrre agar nutriente e fornisce composti simili. Lo scopo dei composti nell'estratto di carne bovina è quello di favorire la crescita dei batteri coltivati sul terreno di agar nutritivo.
Acqua distillata
Acqua distillata è tipicamente usato per fare il terreno di agar nutriente. L'acqua distillata è l'acqua che è stata trattata per rimuovere eventuali contaminanti e minerali disciolti.
L'acqua distillata presente nell'agar nutriente è necessaria per i processi vitali dei microrganismi che vi crescono, così come l'acqua è essenziale per i processi vitali di tutti gli esseri viventi. L'aggiunta di cloruro di sodio alla miscela rende l'ambiente di coltura simile a citoplasma.
Preparazione del terreno di agar nutritivo
Per correttamente preparare una miscela di agar nutriente per la coltura batterica, è importante fare riferimento alle istruzioni specifiche fornite dal produttore dei nutrienti. Alcuni ingredienti o quantità possono variare leggermente a seconda della fonte dell'agar nutriente.
- Sciogliere 28 grammi di polvere di agar nutriente in un litro di acqua distillata.
- Riscaldare la miscela a ebollizione, mescolando continuamente. Continuare a bollire e mescolare la miscela per circa un minuto o fino a quando tutta la polvere non si sarà sciolta.
- Autoclavare la miscela disciolta per 15 minuti a 249,8 gradi Fahrenheit (121 gradi Celsius).
- Lasciare raffreddare leggermente la miscela di agar. Dispensare in piastre o provette. Lasciar solidificare.
- Riposizionare i coperchi e conservare in un ambiente fresco, buio e sterile come il frigorifero. Negozio piastre di agar (piastre Petri) capovolte per evitare la formazione di condensa sul supporto.
Il pH finale dell'agar nutriente preparato dovrebbe essere 6,8. Il mezzo dovrebbe essere di un colore ambrato chiaro e avere la consistenza della gelatina soda. Il terreno di agar nutriente preparato dovrebbe durare in frigorifero fino a due anni, a meno che non vi sia un cambiamento marcato nell'aspetto del terreno che indichi una contaminazione.
