Tecnica per separare i batteri in una coltura mista

Microbiologi, genetisti e biologi molecolari utilizzano colture batteriche per scoprire i segreti della vita. I microbiologi studiano i batteri per scoprire nuovi antibiotici per il trattamento delle infezioni. I genetisti usano i batteri per determinare se le sostanze chimiche possono avere proprietà cancerogene. I biologi molecolari studiano le vie biochimiche dei processi cellulari per comprendere le funzioni degli enzimi che abbiamo in comune con i batteri. Per quanto vari siano gli studi, tutte e tre le scienze isolano le colture batteriche utilizzando la stessa tecnica: striature su piastra di agar.

Nozioni di base sui microbi

Molti batteri hanno forme distintive che facilitano la classificazione.

•••Chad Baker/Photodisc/Getty Images

I microbi sono organismi unicellulari come batteri e funghi. Questi organismi si riproducono rapidamente e sono facili da coltivare, il che li rende particolarmente utili per lo studio. Quando viene scoperto un potenziale nuovo microbo in natura, un campione viene posto in un mezzo di crescita chiamato "brodo". Brodi sono costituiti da acqua sterilizzata, sali, zuccheri e altri nutrienti che promuovono una rapida crescita batterica in un pallone durante incubazione. Tuttavia, il più delle volte, il brodo conterrà più di un tipo di batteri. Per isolare un singolo batterio, lo scienziato spargerà un piccolo campione del brodo su una piastra di agar semisolido usando una tecnica microbica chiamata "striature".

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Piatti di agar

Indossare guanti quando si maneggiano le piastre di agar impedisce ai batteri delle mani di contaminare il campione.

•••Comstock/Comstock/Getty Images

Le piastre di agar sono gel semitrasparenti e semisolidi costituiti da alghe e concentrazioni specifiche di sostanze nutritive. L'utilità dell'agar sta nel fatto che fornisce una superficie liscia e morbida per la crescita dei batteri. Quando uno scienziato mette un singolo batterio sull'agar, si riprodurrà raddoppiandosi migliaia di volte e apparirà come una piccola colonia di singole cellule.

Strumenti per la striatura dei batteri

Gli strumenti di base per striare le colonie batteriche non sono cambiati dalla scoperta della tecnica.

•••Photos.com/Photos.com/Getty Images

Le striature batteriche richiedono tre strumenti: una piastra di agar, un bruciatore ad alcool e un cappio. La piastra di agar è il mezzo di crescita su cui vengono trasferiti i batteri dopo la crescita in brodo. Il bruciatore ad alcool è una piccola lampada ad alcool per sterilizzare l'anello di filo: un manico lungo e sottile con un piccolo anello di filo ignifugo attaccato a un'estremità. L'ansa conterrà una piccola goccia di brodo pieno di batteri durante il trasferimento dei batteri dal brodo alla piastra di agar.

Processo di striatura dei batteri

Un movimento a zigzag è il modo più efficace per diffondere i batteri su una piastra di agar.

•••Hemera Technologies/Photos.com/Getty Images

Strisciare i batteri su una piastra di agar è semplice, ma è necessario eseguire correttamente questo passaggio o non si isolano colonie separate. Riscaldare l'anello sul bruciatore ad alcool per sterilizzare il filo, quindi immergere la punta dell'anello nel brodo. Strisciare la punta dell'anello avanti e indietro più volte su un quarto della piastra di agar. Sterilizzare di nuovo l'anello e strisciare attraverso e perpendicolarmente alle prime strisce. Muovi l'anello avanti e indietro alcune volte su una nuova sezione del piatto. Sterilizza la punta. striscia leggermente sull'ultima sezione striata una volta e sposta l'anello avanti e indietro più volte. La striatura sta diluendo la goccia iniziale di brodo fino a un punto in cui le ultime striature conterranno singole colonie. Posizionare la piastra in un incubatore o su un tavolo a temperatura ambiente e attendere che le colonie crescano durante la notte. Le singole colonie nell'ultima striscia diventeranno colonie isolate di un singolo batterio.

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